目的 探討復(fù)合重組人骨形成蛋白2（recombinant human bone morphogenetic protein 2, rhBMP-2）的殼聚糖明膠支架的體外成骨作用。方法 將rhBMP-2與殼聚糖-明膠支架復(fù)合，按2×104/ml的密度接種成骨細(xì)胞系或成肌細(xì)胞系至rhBMP-2復(fù)合材料上，以及無(wú)rhBMP-2復(fù)合的對(duì)照材料上。A組（2T3成骨細(xì)胞接種組），其中實(shí)驗(yàn)A組：復(fù)合有rhBMP-2的材料14塊，分別于接種培養(yǎng)第3、7、14和21天各取3塊，以管家基因β-tubulin為內(nèi)參照，RT-PCR行半定量分析，測(cè)定骨鈣素基因表達(dá)水平，余2塊于第14天終止培養(yǎng)，茜素紅-S染色觀察鈣鹽沉積情況；對(duì)照A組：未復(fù)合rhBMP-2的材料5塊，接種培養(yǎng)至14 d終止，其中3塊用于測(cè)定骨鈣素基因表達(dá)，2塊測(cè)定鈣鹽沉積。B組（C2C12成肌細(xì)胞接種組），實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組情況、培養(yǎng)時(shí)間及檢測(cè)指標(biāo)同A組。另取接種有rhBMP-2的材料2塊接種2T3成骨細(xì)胞，培養(yǎng)3 d后掃描電鏡觀察細(xì)胞與材料的黏附情況。結(jié)果 A組培養(yǎng)3 d，掃描電鏡可見(jiàn)成骨細(xì)胞緊密黏附于多孔材料網(wǎng)表面，生長(zhǎng)狀態(tài)良好。實(shí)驗(yàn)A組成骨細(xì)胞中骨鈣素基因的表達(dá)為1.28±0.17，對(duì)照A組14 d為0.56±0.09，表明復(fù)合rhBMP-2可促進(jìn)材料中骨鈣素基因表達(dá)，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；rhBMP-2還可誘導(dǎo)不表達(dá)骨鈣素基因的C2C12成肌細(xì)胞出現(xiàn)基因表達(dá)，B組培養(yǎng)21 d，實(shí)驗(yàn)B組為0.58±0.13，對(duì)照B組為0，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。茜素紅-S染色可見(jiàn)，A組材料網(wǎng)絡(luò)內(nèi)均有不同程度的鈣鹽沉積。接種相同的細(xì)胞時(shí)，復(fù)合有rhBMP-2的材料中有更多的鈣鹽沉積。結(jié)論 復(fù)合有rhBMP-2的殼聚糖明膠人工骨支架材料在體外具有良好的誘導(dǎo)成骨能力。
引用本文： 梁東春,左愛(ài)軍,王寶利,張鏡宇. 殼聚糖與重組人骨形成蛋白2復(fù)合物體外成骨作用的研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2005, 19(9): 721-724. doi: 復(fù)制