• 四川大學(xué)華西醫(yī)院人類疾病生物治療教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn):干細(xì)胞與組織工程研究室(成都,610041)△ 通訊作者;

目的 制備脫細(xì)胞人羊膜(HAAM),檢測(cè)其細(xì)胞相容性和組織相容性,探討其作為組織工程支架材料的可行性。方法 新鮮人羊膜經(jīng)漂洗后戊二醛交聯(lián),0.5%SDS震搖24小時(shí),胰蛋白酶消化4小時(shí),充分漂洗,冷凍干燥,分裝,環(huán)氧乙烷消毒備用。倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察表面結(jié)構(gòu),測(cè)量孔徑,并作HE、Mallory染色。體外培養(yǎng)人成纖維細(xì)胞并復(fù)合于HAAM,倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察細(xì)胞的黏附、生長(zhǎng),四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測(cè)定HAAM浸提液對(duì)培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞的細(xì)胞毒性。將HAAM植入SD大鼠背部皮下,觀察其組織相容性。結(jié)果 HAAM的一面為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),孔徑為10~80 nm,另一面為致密纖維結(jié)構(gòu)。HE、Mallory染色表明材料無(wú)細(xì)胞殘留,均為膠原組成。成纖維細(xì)胞能在HAAM上黏附、增殖。MTT示材料細(xì)胞毒性為0或1級(jí),動(dòng)物埋置實(shí)驗(yàn)無(wú)異常反應(yīng)。結(jié)論 應(yīng)用去垢劑-酶消化法處理新鮮人羊膜,能有效去除組織中的細(xì)胞和可溶性成分,可進(jìn)一步降低其免疫原性,保留基質(zhì)及網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),有良好的細(xì)胞相容性和組織相容性,可作為組織缺損的修復(fù)材料及組織工程的膜支架材料。

引用本文: 羅靜聰,李秀群,楊志明,鄧力. 脫細(xì)胞羊膜的制備及其生物相容性研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2004, 18(2): 108-111. doi: 復(fù)制