目的 探討組織工程肌腱保存過程中細(xì)胞存活率研究的方法。方法 采用碘化丙啶（PI）將第4代人成纖維細(xì)胞的死細(xì)胞染色，雙苯并咪唑染料（Ho）染色活細(xì)胞后經(jīng)適當(dāng)波長紫外光激發(fā)，分別產(chǎn)生紅色熒光和藍(lán)色熒光，利用流式細(xì)胞儀區(qū)分活細(xì)胞和死亡細(xì)胞；將組織工程化肌腱種子細(xì)胞懸液4 ml（6.0×105個(gè)/ml）平分成兩管,其中一管反復(fù)凍融，將細(xì)胞凍死；另一管不凍。再將兩管細(xì)胞按不同比例混合，采用熒光染色流式細(xì)胞儀分析，研究其量效關(guān)系；并用熒光攝影，圖像分析，即刻及2小時(shí)熒光標(biāo)記到流式細(xì)胞儀，檢測對細(xì)胞存活率的影響。結(jié)果 熒光染色流式細(xì)胞分析可反映加入凍融死細(xì)胞比例與存活細(xì)胞的量效關(guān)系，即細(xì)胞存活率與未凍融細(xì)胞和凍融細(xì)胞比例分別成正、負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù) r=0.970(P＜0.05)；熒光攝影后圖像分析也顯示了同樣的量效關(guān)系，r=0.982（P lt;0.05）；熒光標(biāo)記后2小時(shí)檢測比即刻檢測細(xì)胞存活率降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt;0.05）；通過熒光顯微鏡可直接觀察組織工程化肌腱上的細(xì)胞。結(jié)論 PI和Ho熒光染色后流式細(xì)胞儀分析及熒光攝影是組織工程肌腱保存過程中細(xì)胞存活率研究的較好方法。

引用本文： 朱肖奇,楊志明,林凡,秦廷武,鄧力,李秀群,解慧琪,羅靜聰. 組織工程肌腱保存過程中細(xì)胞存活率研究方法初步探討. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2004, 18(2): 123-126. doi: 復(fù)制