• 1華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院血液病研究所(武漢,430022);;
  • 2上海市組織工程研究與開發(fā)中心;;
  • 3上海市血液中心輸血研究所血液工程研究室;

目的 探討軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中凋亡發(fā)生以及 caspase- 3的表達(dá)。 方法 采用 Annexin 和TU NEL 法檢測第 1~ 4代軟骨細(xì)胞在體外正常培養(yǎng)體系中第 3天和第 7天的凋亡率 ;RT- PCR和 Western blot分析caspase- 3表達(dá)水平 ;EL ISA檢測 caspase- 3蛋白酶活性?!〗Y(jié)果 第 1~ 4代軟骨細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中均存在不同程度的凋亡現(xiàn)象 ,各代次軟骨細(xì)胞第 7天的凋亡率 15 .7%± 0 .3% ,明顯高于第 3天的 8.9%± 0 .6 % ,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P lt;0 .0 1)。caspase- 3m RNA和蛋白質(zhì)在整個(gè)培養(yǎng)過程中都有表達(dá) ,隨著時(shí)間延長表達(dá)上調(diào) ,第 7天的表達(dá)水平高于第 3天。體外培養(yǎng) 7天后 caspase- 3被激活 ,可檢測到分子量為 2 0 ku的裂解片段。caspase- 3蛋白酶活性隨著培養(yǎng)時(shí)間延長也逐漸增高 ,與細(xì)胞凋亡程度基本一致。 結(jié)論 軟骨細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中存在凋亡 ,caspase- 3參與了凋亡事件并發(fā)揮著重要作用。

引用本文: 肖娟,曹誼林,范華驊,鄒萍,崔磊,劉偉,高峰,陸華中. 體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞凋亡與caspase-3表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2003, 17(5): 418-421. doi: 復(fù)制