• 1. 300384 天津醫(yī)科大學眼科醫(yī)院 眼視光學院 2. 3. 天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院生殖醫(yī)學中心;

目的  觀察人胚胎干細胞(hESC)向視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細胞誘導分化過程中微小核糖核酸(miRNA)-204和211的變化特征。方法  采用自然分化法誘導hESC向RPE細胞分化,細胞鑒定。按細胞誘導分化時間秩序,分為hESC組、含色素細胞組、hESC源性RPE細胞組和原代培養(yǎng)的人胎RPE(hfRPE)細胞組。行miRNA基因表達譜芯片分析、miRNA-204和211實時熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測。 結(jié)果  miRNA芯片分析結(jié)果顯示,隨細胞誘導分化過程, miRNA-204持續(xù)上調(diào)。其中,含色素細胞組是hESC組的5.026倍,hESC 源性RPE細胞組是含色素細胞組的3.337倍;hfRPE細胞組是hESC源性RPE細胞的13.574倍。miRNA-211在細胞誘導分化過程中上調(diào)不明顯,但從hESC源性RPE細胞到hfRPE細胞,上調(diào)倍數(shù)為44.333倍,是miRNA表達譜中差異最大的miRNA。RT-PCR檢測結(jié)果顯示,hESC組、含色素細胞組、hESC源性RPE細胞組、hfRPE細胞組miR-204相對表達量分別為91.81 plusmn;4.43、2 263.09 plusmn;206.39、5 996.80 plusmn;235.42、171 676.45 plusmn;999.82,差異有統(tǒng)計學意義(t=18.22、20.66、279.38,P<0.001);miRNA-211相對表達量分別為2.23 plusmn;0.31、129.33 plusmn;3.75、125.76 plusmn;4.78、16 682.00 plusmn;352.97。含色素細胞組和hESC細胞組、hfRPE細胞組和hESC源性RPE細胞組miR-211相對表達量比較,差異均有統(tǒng)計學意義(t=58.58、81.24,P<0.001)。結(jié)論  miRNA-204和211在hESC向RPE細胞誘導分化過程中持續(xù)單一變化。

引用本文: 李文博,李筱榮,魯振宇,張云山,東莉潔,王飛,董榮. 微小核糖核酸-204和211在人胚胎干細胞向視網(wǎng)膜色素上皮細胞分化過程的變化. 中華眼底病雜志, 2013, 29(1): 72-75. doi: 復制