目的  觀察細(xì)胞周期蛋白依賴激酶5（Cdk5）和p25在不同病程皇家外科學(xué)院（RCS）大鼠視網(wǎng)膜色素變性（RP）模型視網(wǎng)膜中的表達(dá)及與細(xì)胞凋亡的關(guān)系，探討Cdk5/p25介導(dǎo)的光感受器細(xì)胞凋亡在RP發(fā)病過程中的作用。 方法  取RCS RP大鼠（RCS大鼠）及正常對照RCS-rdy+大鼠17、25、35、60日齡視網(wǎng)膜，光學(xué)顯微鏡下觀察視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)，測量外核層厚度；利用免疫組織化學(xué)染色法觀察視網(wǎng)膜中Cdk5、p25和活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleave-caspase 3）的表達(dá)和變化；采用Western blot法測定視網(wǎng)膜中cleave-caspase 3的蛋白質(zhì)水平；原位末端標(biāo)記（TUNEL）法檢測視網(wǎng)膜中凋亡發(fā)生的情況，并對凋亡細(xì)胞平均吸光度［A，舊稱光密度（OD）］值進(jìn)行統(tǒng)計分析。采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。 結(jié)果  隨著出生日齡的增加，RCS大鼠視網(wǎng)膜厚度較RCS-rdy+大鼠變薄，主要表現(xiàn)為視桿與視錐層和外核層明顯變薄。在RCS大鼠17、25、35日齡組，Cdk5、p25和cleave-caspase 3的表達(dá)逐漸增強(qiáng)，60日齡組表達(dá)下降；對照組RCS-rdy+大鼠各日齡組表達(dá)無明顯變化。Western blot法檢測結(jié)果顯示，隨著出生日齡的增加，RCS大鼠各日齡組視網(wǎng)膜cleave-caspase 3的表達(dá)明顯增加，以35日齡組增加最為明顯，而RCS-rdy+大鼠各日齡組視網(wǎng)膜cleave-caspase 3的表達(dá)沒有明顯的變化。TUNEL法檢測結(jié)果顯示，凋亡細(xì)胞主要出現(xiàn)在外核層中，在RCS大鼠17、25、35日齡組，各組凋亡細(xì)胞呈逐漸增多的趨勢，60日齡組凋亡細(xì)胞顯著下降；RCS-rdy+各日齡組凋亡細(xì)胞沒有明顯變化。多變量偏相關(guān)分析結(jié)果顯示，Cdk5表達(dá)與p25表達(dá)、Cdk5表達(dá)與cleave-caspase 3表達(dá)、Cdk5表達(dá)與凋亡細(xì)胞表達(dá)、p25表達(dá)與cleave-caspase 3表達(dá)、p25表達(dá)與凋亡細(xì)胞表達(dá)、cleave-caspase 3表達(dá)與凋亡細(xì)胞表達(dá)的偏相關(guān)系數(shù)分別為0.949、0.808、0.959、0.887、0.979、0.852，P值為0.000，兩兩變量之間均顯著相關(guān)。 結(jié)論  17、25、35日齡RCS大鼠，隨著出生日齡的增加，其視網(wǎng)膜凋亡細(xì)胞逐漸增多，而Cdk5、p25和cleave-caspase 3的表達(dá)逐漸增強(qiáng)。RCS大鼠視網(wǎng)膜中凋亡細(xì)胞變化趨勢與Cdk5、p25和cleave-caspase 3的表達(dá)基本一致。提示RCS大鼠視網(wǎng)膜中光感受器細(xì)胞的凋亡與Cdk5、p25的表達(dá)水平升高有關(guān)，Cdk5可能參與RCS大鼠RP的發(fā)生與發(fā)展。

引用本文： 任英華,盛迅倫,張金金,容維寧,李慧平,劉雅妮. 細(xì)胞周期蛋白依賴激酶5與皇家外科學(xué)院大鼠視網(wǎng)膜色素變性發(fā)病過程中細(xì)胞凋亡的關(guān)系. 中華眼底病雜志, 2013, 29(2): 171-177. doi: 復(fù)制