目的 觀察藍(lán)光照射對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞L-型鈣通道m(xù)RNA表達(dá)的影響。方法 體外培養(yǎng)的第4代人RPE細(xì)胞按隨機(jī)數(shù)字表法分為無(wú)光照組、光照組、光照+硝苯地平組和光照+(-)BayK8644組。(2000 plusmn;500)Lux藍(lán)光照射6 h,終止細(xì)胞培養(yǎng)24 h。光照前加入硝苯地平和(-)BayK8644,濃度均為1 times;10-5 mmol/L。熒光定量聚合酶鏈(PCR)技術(shù)檢測(cè)各組人RPE細(xì)胞L-型鈣通道 alpha;1C亞型、 alpha;1D亞型和 alpha;1F亞型mRNA的表達(dá)。結(jié)果 熒光定量PCR產(chǎn)物 alpha;1C、 alpha;1D、 alpha;1F和內(nèi)參 beta;-肌動(dòng)蛋白的cDNA逆轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度分別為68、157、125、186堿基對(duì),產(chǎn)物的凝膠電泳結(jié)果顯示擴(kuò)增條帶位置與以上片段相吻合。熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,光照組、光照+硝苯地平組、光照+(-)BayK8644組 alpha;1C mRNA的表達(dá)均高于無(wú)光照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);光照+硝苯地平組、光照+(-)BayK8644組 alpha;1C mRNA的表達(dá)均高于光照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);光照+(-)BayK8644組 alpha;1C mRNA的表達(dá)高于光照+硝苯地平組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。光照組、光照+硝苯地平組、光照+(-)BayK8644組 alpha;1D mRNA的表達(dá)均高于無(wú)光照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);光照+(-)BayK8644組 alpha;1D mRNA的表達(dá)與光照組和光照+硝苯地平組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);光照+硝苯地平組與光照組 alpha;1D mRNA的表達(dá)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。光照組、光照+硝苯地平組、光照+(-)BayK8644組 alpha;1F mRNA的表達(dá)均高于無(wú)光照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);光照+硝苯地平組、光照+(-)BayK8644組 alpha;1F mRNA的表達(dá)均高于光照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 藍(lán)光照射可引起人RPE細(xì)胞L-型鈣通道中 alpha;1C、 alpha;1D及 alpha;1F亞型mRNA表達(dá)不同程度的增高;1 times;10-5 mmol/L硝苯地平不能對(duì)抗藍(lán)光對(duì)RPE細(xì)胞L-型鈣通道作用,而1 times;10-5 mmol/L(-)Bay K8644可以增加以上3個(gè)亞基的表達(dá)。
引用本文: 宮鑫,蔡善君,李海輝,呂建平,伍志鵬,宿罡,謝兵. 藍(lán)光照射對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞L-型鈣通道-mRNA表達(dá)的影響. 中華眼底病雜志, 2013, 29(4): 411-415. doi: 復(fù)制
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