目的 探討高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞的作用機(jī)制。方法 原代培養(yǎng)人RPE細(xì)胞,在傳代細(xì)胞生長狀態(tài)良好的情況下,無血清的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基同步化24 h,進(jìn)行分組:(1) C組:BSA濃度為0.1 g/L,各作用24、48 h,分別為C1、C2組;(2) NC組:葡萄糖濃度為5.6 mmol/L,各作用24、48 h,分別為NC1、NC2組;(3) A組:AGEs濃度分別為0.1、0.2、0.4 g/L,各作用24、48 h,作用24 h依次為A1組、A2組、A3組,作用48 h依次為A4組、A5組、A6組。免疫組織化學(xué)檢測AGEs受體(RAGE)、過氧化物酶體增生物激活受體γ輔助激活因子-1α(PGC-1α)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)蛋白的表達(dá);激光共聚焦顯微鏡檢測核因子-κB (NF-κB)的活化。通過圖像分析軟件IPP6.0和統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0進(jìn)行定量分析。結(jié)果 A組RPE細(xì)胞較C組和NC組RAGE、PGC-1α和VEGF蛋白的表達(dá)明顯增加,且隨著AGEs濃度的升高和刺激時(shí)間的延長而增加 (F=294.5、228.3、241.5,P<0.05);隨著AGEs濃度的升高和刺激時(shí)間的延長,NF-κB的活化增加。結(jié)論 AGEs的堆積可導(dǎo)致其受體RAGE在RPE細(xì)胞表達(dá)增加,并促進(jìn)核轉(zhuǎn)錄共同激活因子PGC-1α蛋白的表達(dá)和NF-κB的活化,促進(jìn)RPE細(xì)胞VEGF的分泌。
引用本文: 黃焱,周敏,鄭衛(wèi)東,徐國興. 高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的作用機(jī)制研究. 中華眼底病雜志, 2013, 29(5): 510-513. doi: 復(fù)制