目的 觀察肽聚糖（PGN）對樹突細胞（DCs）分泌促炎性細胞因子的影響以及對實驗性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）輔助性T細胞（Th）17（Th17細胞）反應的調(diào)控。方法 利用粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子、白細胞介素（IL）-4（IL-4）定向誘導健康小鼠骨髓細胞向DCs分化。誘導分化的第6天將DCs分為對照組與實驗組，實驗組加入PGN干預，對照組加入等量無菌磷酸緩沖鹽溶液，培養(yǎng)24 h后利用實時熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術(shù)，檢測2組培養(yǎng)細胞中Th17細胞分化相關(guān)的細胞因子IL23、腫瘤壞死因子- alpha;（TNF- alpha;）、IL-6、IL-1 beta; mRNA相對表達量。采用光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白（IRBP）1-20多肽片段（IRBP1-20）和弗氏不完全佐劑及結(jié)核分枝桿菌H37RA免疫C57BL/6小鼠。免疫后13 d分離EAU模型鼠脾臟和淋巴結(jié)的IRBP1-20特異的T細胞與經(jīng)PGN干預或未干預的DCs共培養(yǎng)。收集共培養(yǎng)后2 d的細胞，實時熒光RT-PCR檢測維甲酸相關(guān)孤兒受體 gamma;t（ROR gamma;t）、IL-17、T-bet、 gamma;干擾素（IFN- gamma;） mRNA相對表達量；此外，收集共培養(yǎng)后2、5、7 d的細胞分別進行流式細胞儀分析，觀察Th17、Th1細胞的變化。結(jié)果 實時熒光RT-PCR檢測結(jié)果顯示，實驗組DCs經(jīng)PGN干預后IL-23、IL-1 beta;、IL-6、TNF- alpha; mRNA相對表達量較對照組顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義（t=-14.363、-5.627、-3.85、-28.151；P＜0.05）；實驗組ROR gamma;t、IL-17 mRNA相對表達量較對照組顯著升高（t=-5.601、-19.76；P＜0.05），而T-bet、IFN- gamma; mRNA相對表達量較對照組顯著降低（t=4.717、11.207；P＜0.05）。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示，與對照組相比，實驗組的DCs與T細胞共培養(yǎng)后2、5、7 d，IL-17+細胞的百分比升高（t=-2.944、-3.03、-4.81；P＜0.05），而IFN- gamma;+細胞的比例變化不大（t=-1.25、-0.18、-2.16；P＞0.05）。結(jié)論 PGN能夠刺激DCs分泌IL-23、TNF- alpha;、IL-6及IL-1 beta;等Th17細胞分化相關(guān)的細胞因子，促進EAU中Th17細胞的分化和增生。
引用本文： 肖青,粘紅,魏瑞華,張曉敏,李雪,劉勛,李筱榮. 肽聚糖對樹突細胞分泌促炎性細胞因子以及實驗性自身免疫性葡萄膜炎輔助性T細胞17的影響. 中華眼底病雜志, 2013, 29(6): 600-604. doi: 復制