目的 觀察 alpha;-硫辛酸對高壓條件下培養(yǎng)大鼠視網膜神經節(jié)細胞（RGC）的保護作用。方法 將RGC分為正常對照組、陰性對照組、單純加壓組、加壓聯(lián)合不同濃度 alpha;-硫辛酸干預組。正常對照組和單純加壓組不做任何處理；陰性對照組僅接受200 mu;mol/L alpha;-硫辛酸預處理；加壓聯(lián)合不同濃度的 alpha;硫辛酸干預組分別用50、100、200 mu;mol/L等3種不同濃度的 alpha;-硫辛酸對其進行干預。 alpha;-硫辛酸預處理1 h后，單純加壓組和各干預組置于50 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）下培養(yǎng)24 h；正常對照組、陰性對照組置于常壓下培養(yǎng)24 h。分別用噻唑藍比色法檢測各組細胞的活性；4，6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚(DAPI）染色觀察各組細胞核形態(tài)改變；實時聚合酶鏈反應(Real-time PCR)及蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測并比較各組細胞中錳超氧化物歧化酶（MnSOD） mRNA和蛋白表達水平的變化。結果 單純加壓組細胞活性為（65.6 plusmn;3.4）%，50、100、200 mu;mol/L 3種濃度的 alpha;-硫辛酸干預組細胞活性分別為（75.1 plusmn;3.3）%、（81.8 plusmn;2.9）%、（87.9 plusmn;3.1）%，均較單純加壓組顯著增高（t=5.108、10.007、12.513，P＜0.05）。DAPI染色顯示，加壓后RGC-5細胞核可見空泡、染色質高度凝聚、邊緣化等典型的凋亡特征，而 alpha;-硫辛酸干預組僅有部分細胞核染色質表現(xiàn)出濃縮現(xiàn)象。Real-time PCR及Western blot檢測結果顯示，加壓培養(yǎng)后細胞內MnSOD mRNA和蛋白相對表達量較正常對照組顯著降低（t=22.045、26.979，P＜0.01）；與單純加壓組相比， alpha;-硫辛酸干預組細胞內MnSOD mRNA和蛋白相對表達量均顯著增高，差異有統(tǒng)計學意義（t=9.171、12.267、23.567、7.723、12.009、28.198，P＜0.05）；不同濃度的 alpha;-硫辛酸干預組之間，隨 alpha;-硫辛酸濃度增加，MnSOD mRNA和蛋白相對表達量呈升高趨勢，且差異有統(tǒng)計學意義（F=134.273、194.597，P＜0.01）。結論 應用 alpha;-硫辛酸可以顯著提高高壓條件下大鼠RGC的細胞活性及細胞內MnSOD的表達水平，增強細胞抗氧化損傷能力。
引用本文： 劉兵,郭大東,畢宏生,郭媛媛,陳寧虹,馬曉華. α-硫辛酸對高壓條件下培養(yǎng)大鼠視網膜神經節(jié)細胞的保護作用. 中華眼底病雜志, 2012, 28(5): 501-506. doi: 復制