• 200025 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院眼科;

  目的  觀察色素上皮衍生因子(PEDF)對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜谷氨酸代謝的影響。方法  Sprague-Dawley大鼠78只,分為模型組、模型對(duì)照組、PEDF干預(yù)組(干預(yù)組)、干預(yù)對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)去除血糖恢復(fù)鼠和實(shí)驗(yàn)期間死亡鼠,每組以12只大鼠作為統(tǒng)計(jì)樣本。模型組、干預(yù)組、干預(yù)對(duì)照組大鼠采用鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型。模型組大鼠不作任何干預(yù),模型對(duì)照組為相同月齡的正常大鼠。干預(yù)組大鼠左眼玻璃體腔注射0.1  mu;g/ mu;l的PEDF 5.0  mu;l,干預(yù)對(duì)照組大鼠左眼玻璃體腔注射相同容積的磷酸鹽緩沖液。采用蛋白免疫印跡法(Western bolt)和實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法檢測(cè)視網(wǎng)膜L-谷氨酸-L-門冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(GLAST)表達(dá)的變化,高壓液相色譜法(HPLC)觀察視網(wǎng)膜谷氨酸的含量變化。將體外培養(yǎng)的大鼠視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組、PEDF干預(yù)組(干預(yù)組)和干預(yù)對(duì)照組,熒光免疫法和實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)M uuml;ller細(xì)胞GLAST表達(dá)的改變,根據(jù)[3H]標(biāo)記的D,L  ndash;谷氨酸攝入量判斷M uuml;ller細(xì)胞的攝取功能。結(jié)果  實(shí)時(shí)熒光PCR法和Western bolt檢測(cè)結(jié)果顯示,相對(duì)于模型對(duì)照組大鼠,模型組大鼠視網(wǎng)膜GLAST表達(dá)降低 (實(shí)時(shí)熒光PCR法:t=8.86, P<0.01;Western blot:t=3.42,P<0.05),視網(wǎng)膜谷氨酸含量升高(t=4.01,P<0.05);干預(yù)組大鼠視網(wǎng)膜GLAST表達(dá)與干預(yù)對(duì)照組視網(wǎng)膜GLAST表達(dá)比較,干預(yù)組大鼠視網(wǎng)膜GLAST的表達(dá)升高(實(shí)時(shí)熒光PCR法:t=3.56,P<0.05;Western blot:t=3.52, P<0.05);視網(wǎng)膜谷氨酸含量下調(diào)(t=4.36, P<0.05)。實(shí)時(shí)熒光PCR法和熒光免疫法檢測(cè)結(jié)果顯示,高糖可以降低視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞GLAST的表達(dá)(實(shí)時(shí)熒光PCR法:t=3.48,P<0.05;熒光免疫法:t=4.72,P<0.05);[3H]標(biāo)記的D,L ndash;谷氨酸攝入量結(jié)果顯示,高糖可以下調(diào)視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞GLAST的功能(t=3.81, P<0.05);經(jīng)PEDF處理后,可以明顯改善高糖狀態(tài)下視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞GLAST的表達(dá)(實(shí)時(shí)熒光PCR法:t=6.82, P<0.01;熒光免疫法:t=3.72,P<0.05)和對(duì)谷氨酸的攝取功能(t=4.14, P<0.05)。結(jié)論  PEDF可通過(guò)改善糖尿病大鼠視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞中GLAST功能從而改善谷氨酸循環(huán),抑制神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的死亡。

引用本文: 沈璽,焦秦,鐘一聲,謝冰. 色素上皮衍生因子對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜谷氨酸代謝的影響. 中華眼底病雜志, 2011, 27(3): 226-230. doi: 復(fù)制