目的 觀察不同細胞密度的微囊化人內(nèi)皮抑素/293（hES/293）細胞生物學(xué)性狀及其對人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）增生的抑制作用。方法 采用聚電解質(zhì)絡(luò)合法制作不同密度微囊化hES/293細胞，分為1×104個/ml組（A組）、1×106個/ml組（B組）、1×108個/ml組（C組）；同時將微囊內(nèi)不包裹hES/293細胞者設(shè)為對照組（D組）；每組6個樣本。培養(yǎng)后1、3、7、14、35 d，錐蟲藍染色計數(shù)微囊囊內(nèi)細胞總數(shù)、活細胞數(shù)和存活率；噻唑藍（MTT）比色法檢測各組微囊化hES/293細胞的生長情況；酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法檢測微囊化hES/293細胞囊外內(nèi)皮抑素（ES）蛋白釋放量。取生長狀態(tài)良好的HUVEC分別與A、B、C、D組微囊化hES/293細胞共同培養(yǎng)。于共同培養(yǎng)后24、72、120 h，MTT比色法檢測微囊化hES/293細胞對HUVEC增生的抑制作用。結(jié)果 A、B、C組微囊囊內(nèi)hES/293細胞總數(shù)和活細胞數(shù)均隨時間延長而增多，囊內(nèi)細胞存活率于培養(yǎng)后3 d最高。A、B、C組微囊化hES/293細胞生長速率比較，培養(yǎng)后1 d時組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；培養(yǎng)后3 d，A組較B、C組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；培養(yǎng)后7、14、35 d，B組較A、C組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。A、B、C組微囊化hES/293細胞囊外ES蛋白釋放量比較，培養(yǎng)后1、14 d時組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；培養(yǎng)后3 d，A組較B、C組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；培養(yǎng)后7、35 d，B組較A組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。共同培養(yǎng)后24 h，A、B、C組對HUVEC均未表現(xiàn)出抑制作用（P＞0.05）；共同培養(yǎng)后72、120 h，A、B、C組均明顯抑制HUVEC增生，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論細胞密度為1×106個/ml的微囊化hES/293細胞生長穩(wěn)定、存活率較高，可持續(xù)穩(wěn)定的釋放ES蛋白。不同密度的微囊化hES/293細胞均可抑制HUVEC增生。
引用本文： 張鵬飛,蔡善君,詹文芳,謝兵,李紅,宿罡. 微囊化人內(nèi)皮抑素/293細胞生物學(xué)性狀及其對人臍靜脈內(nèi)皮細胞增生的抑制作用. 中華眼底病雜志, 2011, 27(4): 370-374. doi: 復(fù)制