• 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科,福建省血液病研究所 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科,福建省血液病研究所 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科,福建省血液病研究所 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科,福建省血液病研究所 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科,福建省血液病研究所 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科,福建省血液病研究所 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科,福建省血液病研究所 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科;

目的 探討三氧化二砷(As2O3 )誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(RB)Y79細(xì)胞系P16基因去甲基化及轉(zhuǎn)錄激活的可能機(jī)制。方法四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT)法檢測(cè)As2O3對(duì)Y79細(xì)胞生長(zhǎng)和增生的抑制作用;流式細(xì)胞儀DNA含量分析法探討As2O3對(duì)Y79細(xì)胞周期的影響;巢式甲基特異性聚合酶鏈反應(yīng)法(n-MSP)及DNA克隆測(cè)序分析法檢測(cè)As2O3作用前后Y79細(xì)胞P16基因甲基化狀態(tài);逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)P16基因、DNA甲基轉(zhuǎn)移酶 (DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA的表達(dá)。結(jié)果 As2O3 能明顯抑制Y79細(xì)胞生長(zhǎng),使細(xì)胞阻滯于G0~G1期;未處理組細(xì)胞P16基因不表達(dá),As2O3作用48 h后P16基因表達(dá)增強(qiáng),甲基化程度減弱,甲基轉(zhuǎn)移酶DNMT3A、DNMT3B mRNA 表達(dá)下降。結(jié)論 RB Y79細(xì)胞系存在P16基因高甲基化,As2O3通過(guò)抑制DNA甲基轉(zhuǎn)移酶mRNA表達(dá)誘導(dǎo)P16基因去甲基化,顯著上調(diào)P16基因mRNA表達(dá),將細(xì)胞阻滯于G0~G1期, 抑制Y79細(xì)胞增生。

引用本文: 林雯 喻愛(ài)芳 徐國(guó)興 王婷婷 沈松菲 付海英 謝茂松 沈建箴. 砷劑誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Y79細(xì)胞系P16基因去甲基化及轉(zhuǎn)錄. 中華眼底病雜志, 2009, 25(2): 99-102. doi: 復(fù)制