• 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院眼科;

目的 觀察以腹腔滲出細(xì)胞為飼養(yǎng)細(xì)胞對(duì)原代培養(yǎng)的成年大鼠視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響。方法 制備大鼠腹腔滲出細(xì)胞,CD68免疫組織化學(xué)染色鑒定巨噬細(xì)胞,墨汁吞噬實(shí)驗(yàn)檢測(cè)吞噬活性。酶消化法原代培養(yǎng)成年大鼠視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白免疫組織化學(xué)染色鑒定。飼養(yǎng)細(xì)胞加入M uuml;ller細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)后,流式細(xì)胞術(shù)分析M uuml;ller細(xì)胞的生長(zhǎng)周期,末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口翻譯法(TUNEL)染色檢測(cè)凋亡情況。結(jié)果 大鼠腹腔滲出細(xì)胞中巨噬細(xì)胞占95%以上,對(duì)墨汁顆粒有良好的吞噬能力。原代培養(yǎng)的M uuml;ller細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),胞體較大、扁平,第3代細(xì)胞生長(zhǎng)減慢。加入飼養(yǎng)細(xì)胞后,M uuml;ller細(xì)胞生長(zhǎng)增生加快,S期和G2/M期細(xì)胞增多(S期, t=4.172, P lt;0.001;G2/M期, t=3.562, P lt;0.01),第1代細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間由25~30 d縮短至18~22 d,第2代由10~15 d縮短至7~10 d;M uuml;ller細(xì)胞凋亡減少(t=3.804, P lt;0.01)。結(jié)論 以腹腔滲出細(xì)胞為飼養(yǎng)細(xì)胞能促進(jìn)M uuml;ller細(xì)胞的生長(zhǎng)增生,抑制其凋亡,加快M uuml;ller細(xì)胞的培養(yǎng)速度,是原代培養(yǎng)成年大鼠視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞的一種有效方法。

引用本文: 毛俊峰,劉雙珍,秦文娟,李鳳云,譚淺,吳小影. 腹腔滲出細(xì)胞輔助原代培養(yǎng)成年大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞. 中華眼底病雜志, 2009, 25(3): 206-209. doi: 復(fù)制