目的 分離及純化人眼脈絡膜黑色素瘤細胞OCM-1中的腫瘤干細胞。 方法 將OCM-1細胞復蘇，使用Dubecco標準改良Eagle培養(yǎng)基（DMEM/F12）培養(yǎng)后，改用無血清化學限定培養(yǎng)基（SFM），并分離純化培養(yǎng)腫瘤干細胞，用流式細胞儀檢測神經(jīng)干細胞特異性標記物CD133的表達比率,并對第六代細胞進行神經(jīng)RNA結合蛋白（musashi-1）免疫細胞化學染色，顯微鏡下觀察陽性細胞比率。 結果 在標準DMEM/F12培養(yǎng)基中貼壁生長的OCM1細胞用SFM培養(yǎng)基培養(yǎng)后，貼壁細胞顯著減少，至第6代時細胞均為懸浮團狀集落生長，呈現(xiàn)典型的干細胞生長方式。在不同代的細胞中，CD133均有陽性，未經(jīng)過分離的OCM-1細胞、經(jīng)過SFM培養(yǎng)并分離的第1、2代OCM1細胞的陽性比率分別2.5％、217％、57.8％，第6代的細胞CD133陽性比率達到79.8％，musashi-1強陽性表達。 結論 脈絡膜黑色素瘤細胞中存在腫瘤干細胞。使用干細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)，并通過限制分化、連續(xù)傳代的方法，可分離純化出懸浮克隆集落生長的干細胞。 (中華眼底病雜志，2007， 23：87-90）
引用本文： 劉斌,李永平,彭展. 人眼脈絡膜黑色素瘤OCM-1細胞中腫瘤干細胞的分離純化. 中華眼底病雜志, 2007, 23(2): 87-90. doi: 復制