目的  探討缺氧誘導(dǎo)因子-1 alpha;（HIF-1 alpha;）和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）小片段干擾性RNA（siRNA）對人血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF表達(dá)的影響。 方法  構(gòu)建HIF-1 alpha; siRNA重組質(zhì)粒。將體外培養(yǎng)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC-12）分成常氧（20%）組和低氧（1%）組。低氧組中，采用脂質(zhì)體Lipofectamine TM 2000（LF2000）分別轉(zhuǎn)染空載體質(zhì)粒（空載體組）、HIF-1 alpha; siRNA（HIF-1 alpha;組）、VEGF-165 siRNA（VEGF組）和HIF-1 alpha; siRNA+VEGF165 siRNA（共轉(zhuǎn)染組）。低氧組中未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞為對照組。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）鑒定基因轉(zhuǎn)染效率；RT-PCR和免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測各組細(xì)胞中VEGF基因和蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果  成功構(gòu)建HIF-1 alpha; siRNA重組質(zhì)粒。人血管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)染24 h后，HIF-1 alpha; siRNA和VEGF-165 siRNA重組質(zhì)粒有表達(dá)。常氧組細(xì)胞中僅見微弱的VEGF mRNA和蛋白表達(dá)，而低氧組表達(dá)明顯上調(diào)；HIF-1 alpha;組、VEGF組和共轉(zhuǎn)染組表達(dá)較對照組減弱，其中共轉(zhuǎn)染組抑制效果最明顯。 結(jié)論  HIF-1 alpha;和VEGF165 siRNA能有效抑制人血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF的表達(dá)。

引用本文： 蔣劍,夏曉波,許惠卓,熊思齊,劉雙珍,李巖. 缺氧誘導(dǎo)因子-1α和血管內(nèi)皮生長因子干擾性RNA對人血管內(nèi)皮細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的抑制. 中華眼底病雜志, 2007, 23(6): 422-425. doi: 復(fù)制