• 北京大學(xué)人民醫(yī)院眼科中心 100005;

目的 探討活體染料羧基熒光素乙酰乙酸琥珀酰亞胺酯(CFSE)標記兔眼虹膜色素上皮(IPE)細胞的可行性。 方法 使用酶消化加機械分離的方法分離培養(yǎng)兔眼IPE細胞,將傳3~4代的IPE細胞用2.5、5、10、20、40  mu;mol/L濃度的CFSE分別作用1、5、10 min進行染色,通過觀察染色后的細胞熒光強度和細胞貼壁率篩選出最理想的標記條件。采用流式細胞術(shù)追蹤檢測標記的IPE細胞的熒光強度變化。用免疫熒光抗體標記法檢測此染色劑有無滲漏以及是否對周圍細胞著染。 結(jié)果 濃度為20  mu;mol/L的CFSE 37℃下水浴作用1 min為IPE細胞染色、觀測、研究的最適條件。流式細胞儀和熒光顯微鏡觀察結(jié)果顯示,CFSE對IPE細胞染色可持續(xù)4周以上,未發(fā)生染料滲漏或轉(zhuǎn)染其它細胞,且此濃度的CFSE不影響細胞的性狀。 結(jié)論 活體染料CFSE是一種染色率高,追蹤時間長,應(yīng)用簡便安全可靠的標記兔IPE細胞的新方法。 (中華眼底病雜志, 2006, 22: 261-264)

引用本文: 彭紹民,張中宇,黎曉新,叢麗丹. 活體染料羧基熒光素乙酰乙酸對兔眼虹膜色素上皮細胞體外染色的研究. 中華眼底病雜志, 2006, 22(4): 261-264. doi: 復(fù)制