目的 構建在視網(wǎng)膜組織特異性表達的人血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）165基因。 方法 用聚合酶鏈反應(PCR)方法從BLAB/C鼠全基因組擴增能在視網(wǎng)膜組織特異性表達的rho啟動子，經(jīng)限制性內(nèi)切酶純化后克隆于質(zhì)粒pcDNA3.1+-VEGF165中，建立重組質(zhì)粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165，通過限制性內(nèi)切酶酶切分析及PCR鑒定篩選出正確重組質(zhì)粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165,由jetPEI介導轉染人視網(wǎng)膜色素上皮細胞和人臍靜脈內(nèi)皮細胞，并通過免疫組織化學染色以及繪制細胞生長曲線檢測在人視網(wǎng)膜色素上皮細胞和人臍靜脈內(nèi)皮細胞中VEGF蛋白的表達。 結果 在人視網(wǎng)膜色素上皮細胞中，重組質(zhì)粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165比質(zhì)粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165的VEGF蛋白表達強，在人臍靜脈內(nèi)皮細胞，兩者的表達量無明顯差別。 結論 pcDNA3.1+-rho-VEGF165載體的構建為進一步研究VEGF在視網(wǎng)膜新生血管形成中的致病機理提供基礎材料，并為進一步建立視網(wǎng)膜特異性表達VEGF轉基因鼠模型建立了基礎。 (中華眼底病雜志,2005,21:106-109)
引用本文： 呂秀蘭,呂林,李永浩,張靜琳,李石毅. 視網(wǎng)膜特異性表達人血管內(nèi)皮生長因子 基因載體的構建. 中華眼底病雜志, 2005, 21(2): 106-109. doi: 復制
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