• 1.蘭州大學(xué)第二醫(yī)院普外科（甘肅蘭州 730030）;;
  • 2.甘肅省慶陽市人民醫(yī)院普外科 （甘肅慶陽 745000）;

目的 　探討氧化性損傷在大鼠梗阻性黃疸肝功能損害發(fā)生中的作用以及褪黑素對(duì)其的保護(hù)作用。
方法 　成年雄性SD大鼠64只，采用完全隨機(jī)化法隨機(jī)分為正常對(duì)照組（CN組，n=16）、假手術(shù)組（SO組，n=16）、膽總管結(jié)扎組（BDL組，n=16）和膽總管結(jié)扎＋褪黑素治療組（BDL＋MT組，n=16）。應(yīng)用膽總管結(jié)扎法建立梗阻性黃疸模型，褪黑素治療組大鼠手術(shù)前1d至手術(shù)后7d連續(xù)腹腔注射褪黑素0.5mg/（kg·d），每日10∶00給藥。分別于手術(shù)后第4d和第8d兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集標(biāo)本，檢測(cè)血漿中總膽紅素（TBIL）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（AKP）及γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）水平變化，比色法測(cè)定肝組織勻漿中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）含量或活力變化，采用TUNEL法檢測(cè)肝組織細(xì)胞凋亡，并計(jì)算肝細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）。
結(jié)果 　與CN組和SO組比較，BDL組大鼠血漿TBIL、ALT、AST、AKP、GGT水平和肝組織MDA含量明顯升高（P＜0.05，P＜0.01），SOD、CAT、GSH-Px活力或GSH含量顯著降低（P＜0.01），AI增加（P＜0.01）； 褪黑素治療可使血漿TBIL、ALT、AST、AKP、GGT和肝組織MDA含量顯著降低，SOD、CAT、GSH-Px活力或GSH含量明顯升高（P＜0.01），AI減少（P＜0.01）。BDL組肝組織MDA含量與血漿TBIL、ALT、AKP、AST、GGT水平均呈顯著正相關(guān)（P＜0.01），GSH、SOD、CAT、GSH-Px與血漿TBIL、ALT、AKP、ALT、AST水平分別均呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）；BDL組肝組織MDA含量的變化與AI呈正相關(guān)（P＜0.01），而GSH含量及SOD、CAT、GSH-Px活力分別與AI呈負(fù)相關(guān)（P＜0.01）。
結(jié)論　 大鼠梗阻性黃疸時(shí)，肝組織自由基大量產(chǎn)生介導(dǎo)的氧化性損傷及其細(xì)胞凋亡，參與了肝功能損害的發(fā)生、發(fā)展。褪黑素對(duì)大鼠梗阻性黃疸肝功能損害有一定程度的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與其拮抗肝組織過氧化和細(xì)胞凋亡有關(guān)。

引用本文： 張小明,馬平安,陳家先,寇治民,張有成. 褪黑素對(duì)梗阻性黃疸大鼠肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志, 2013, 20(8): 878-883. doi: 復(fù)制

版權(quán)信息： ?四川大學(xué)華西醫(yī)院華西期刊社《中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志》版權(quán)所有，未經(jīng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、改編

1. Gonzalez-Correa JA， De La Cruz JP， Martin-Aurioles E， et al. Effects of S-adenosyl-L-methionine on hepatic and renal oxidativestress in an experimental model of acute biliary obstruction in rats[J]. Hepatology， 1997， 26(1)：121-127.
2. 張永剛， 遲彥邦， 楊彤翰， 等. 膽道梗阻后肝臟自由基損傷及粉防己堿保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志， 1999， 16(5)：406-407.
3. Granato A， Gores G， Vilei MT， et al. Bilirubin inhibits bile acid induced apoptosis in rat hepatocytes[J]. Gut， 2003， 52(12)：1774-1778.
4. 李明正. 褪黑素的抗自由基氧化損傷和防護(hù)作用[J]. 國外醫(yī)學(xué)：衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)， 2000， 27(1)：26-29.
5. Shaker ME， Houssen ME， Abo-Hashem EM， et al. Comparison of vitamin E， L-carnitine and melatonin in ameliorating Carbon tetrachloride and diabetes induced hepatic oxidative stress[J]. J Physiol Biochem， 2009， 65(3)：225-233.
6. Ohta Y， Kongo M， Kishikawa T. Melatonin exerts a therapeutic effect on cholestatic liver injury in rats with bile duct ligation[J]. J Pineal Res， 2003， 34(2)：119-126.
7. Cruz A， Padillo FJ， Túnez I， et al. Melatonin protects against renal oxidative stress after obstructive jaundice in rats[J]. Eur J Pharmacol， 2001， 425(2)：135-139.
8. Aktas C， Kanter M， Erboga M， et al. Melatonin attenuates oxid-ative stress， liver damage and hepatocyte apoptosis after bile-duct ligation in rats[J]. Toxicol Ind Health， 2012 Oct 24. [Epub ahead of print].
9. 張小明， 寇治民， 康二虎， 等. 褪黑素對(duì)大鼠梗阻性黃疸腎損害的保護(hù)作用[J]. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志， 2005， 12(1)：55-58.
10. Montilla P， Cruz A， Padillo FJ， et al. Melatonin versus vitamin E as protective treatment against oxidative stress after extra-hepatic bile duct ligation in rats[J]. J Pineal Res， 2001， 31(2)：138-144.
11. Inan M， Sayek I， Tel BC， et al. Role of endotoxin and nitric oxidein the pathogenesis of renal failure in obstructive jaundice[J]. BrJ Surg， 1997， 84(7)：943-947.
12. Hu S， Yin S， Jiang X， et al. Melatonin protects against alcoholic liver injury by attenuating oxidative stress， inflammatory response， and apoptosis[J]. Eur J Pharmacol， 2009， 616(1-3)：287-292.
13. Brown KM， Brems JJ， Moazzam FN， et al. The nitric oxide donormolsidomine improves survival and reduces hepatocyte apoptosis in cholestasis and endotoxemia[J]. J Am Coll Surg， 2003， 197(2)：261-269.
14. Andrabi SA， Sayeed I， Siemen D， et al. Direct inhibition of the mitochondrial permeability transition pore：a possible mechanism responsible for anti-apoptotic effects of melatonin[J]. FASEB J， 2004， 18(7)：869-871.
15. Jones BA， Rao YP， Stravitz RT， et al. Bile salt-induced apoptosisof hepatocytes involves activation of protein kinase C[J]. Am J Physiol， 1997， 272(5 Pt 1)：G1109-G1115.
16. Kayanoki Y， Fujii J， Islam KN， et al. The protective role of glutathione peroxidase in apoptosis induced by reactive oxygen species[J]. J Biochem， 1996， 119(4)：817-822.
17. 洪汝濤， 陳世林， 阮海玲， 等. 褪黑素對(duì)大鼠急性酒精性肝損傷的作用[J]. 中國藥理學(xué)通報(bào)， 2011， 27(11)：1596-1599.
18. 陳風(fēng)， 湯琳， 汪健， 等. 胰膽管合流異常膽道損傷抗氧化治療的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志， 2012， 19(10)：1069-1073.
19. Kang JW， Lee SM. Melatonin inhibits type 1 interferon signaling of toll-like receptor 4 via heme oxygenase-1 induction in hepatic ischemia/reperfusion[J]. J Pineal Res， 2012， 53(1)：67-76.
20. Hsu JT， Kuo CJ， Chen TH， et al. Melatonin prevents hemorrhagic shock-induced liver injury in rats through an Akt-dependent HO-1 pathway[J]. J Pineal Res， 2012， 53(4)：410-416.
21. Cheshchevik VT， Lapshina EA， Dremza IK， et al. Rat livermitochondrial damage under acute or chronic Carbon tetrachloride-induced intoxication：protection by melatonin and cranberry flavo-noids[J]. Toxicol Appl Pharmacol， 2012， 261(3)：271-279.
22. Wang H， Xu DX， Lv JW， et al. Melatonin attenuates lipopolysaccharide (LPS)-induced apoptotic liver damage in D-galactosamine-sensitized mice[J]. Toxicology， 2007， 237(1-3)：49-57.
23. El-Missiry MA， Fayed TA， El-Sawy MR， et al. Ameliorative effect of melatonin against gamma-irradiation-induced oxidativestress and tissue injury[J]. Ecotoxicol Environ Saf， 2007， 66(2)：.
24. Jahovic N， Cevik H， Sehirli AO， et al. Melatonin prevents methotrexate-induced hepatorenal oxidative injury in rats[J]. J Pineal Res， 2003， 34(4)：282-287.
25. Korkmaz GG， Uzun H， Cakatay U， et al. Melatonin ameliorates oxidative damage in hyperglycemia-induced liver injury[J]. Clin Invest Med， 2012， 35(6)：E370-E377.
26. Reiter RJ. Melatonin：that ubiquitously acting pineal hormone[J]. Physiology， 1991， 6(5)：223-227.
27. López PM， Fiñana IT， De Agueda MC， et al. Protective effect of melatonin against oxidative stress induced by ligature of extra-hepatic biliary duct in rats：comparison with the effect of S-adenosyl-L-methionine[J]. J Pineal Res， 2000， 28(3)：143-149.
28. -286.
  1. 1. Gonzalez-Correa JA， De La Cruz JP， Martin-Aurioles E， et al. Effects of S-adenosyl-L-methionine on hepatic and renal oxidativestress in an experimental model of acute biliary obstruction in rats[J]. Hepatology， 1997， 26(1)：121-127.
  2. 2. 張永剛， 遲彥邦， 楊彤翰， 等. 膽道梗阻后肝臟自由基損傷及粉防己堿保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志， 1999， 16(5)：406-407.
  3. 3. Granato A， Gores G， Vilei MT， et al. Bilirubin inhibits bile acid induced apoptosis in rat hepatocytes[J]. Gut， 2003， 52(12)：1774-1778.
  4. 4. 李明正. 褪黑素的抗自由基氧化損傷和防護(hù)作用[J]. 國外醫(yī)學(xué)：衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)， 2000， 27(1)：26-29.
  5. 5. Shaker ME， Houssen ME， Abo-Hashem EM， et al. Comparison of vitamin E， L-carnitine and melatonin in ameliorating Carbon tetrachloride and diabetes induced hepatic oxidative stress[J]. J Physiol Biochem， 2009， 65(3)：225-233.
  6. 6. Ohta Y， Kongo M， Kishikawa T. Melatonin exerts a therapeutic effect on cholestatic liver injury in rats with bile duct ligation[J]. J Pineal Res， 2003， 34(2)：119-126.
  7. 7. Cruz A， Padillo FJ， Túnez I， et al. Melatonin protects against renal oxidative stress after obstructive jaundice in rats[J]. Eur J Pharmacol， 2001， 425(2)：135-139.
  8. 8. Aktas C， Kanter M， Erboga M， et al. Melatonin attenuates oxid-ative stress， liver damage and hepatocyte apoptosis after bile-duct ligation in rats[J]. Toxicol Ind Health， 2012 Oct 24. [Epub ahead of print].
  9. 9. 張小明， 寇治民， 康二虎， 等. 褪黑素對(duì)大鼠梗阻性黃疸腎損害的保護(hù)作用[J]. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志， 2005， 12(1)：55-58.
  10. 10. Montilla P， Cruz A， Padillo FJ， et al. Melatonin versus vitamin E as protective treatment against oxidative stress after extra-hepatic bile duct ligation in rats[J]. J Pineal Res， 2001， 31(2)：138-144.
  11. 11. Inan M， Sayek I， Tel BC， et al. Role of endotoxin and nitric oxidein the pathogenesis of renal failure in obstructive jaundice[J]. BrJ Surg， 1997， 84(7)：943-947.
  12. 12. Hu S， Yin S， Jiang X， et al. Melatonin protects against alcoholic liver injury by attenuating oxidative stress， inflammatory response， and apoptosis[J]. Eur J Pharmacol， 2009， 616(1-3)：287-292.
  13. 13. Brown KM， Brems JJ， Moazzam FN， et al. The nitric oxide donormolsidomine improves survival and reduces hepatocyte apoptosis in cholestasis and endotoxemia[J]. J Am Coll Surg， 2003， 197(2)：261-269.
  14. 14. Andrabi SA， Sayeed I， Siemen D， et al. Direct inhibition of the mitochondrial permeability transition pore：a possible mechanism responsible for anti-apoptotic effects of melatonin[J]. FASEB J， 2004， 18(7)：869-871.
  15. 15. Jones BA， Rao YP， Stravitz RT， et al. Bile salt-induced apoptosisof hepatocytes involves activation of protein kinase C[J]. Am J Physiol， 1997， 272(5 Pt 1)：G1109-G1115.
  16. 16. Kayanoki Y， Fujii J， Islam KN， et al. The protective role of glutathione peroxidase in apoptosis induced by reactive oxygen species[J]. J Biochem， 1996， 119(4)：817-822.
  17. 17. 洪汝濤， 陳世林， 阮海玲， 等. 褪黑素對(duì)大鼠急性酒精性肝損傷的作用[J]. 中國藥理學(xué)通報(bào)， 2011， 27(11)：1596-1599.
  18. 18. 陳風(fēng)， 湯琳， 汪健， 等. 胰膽管合流異常膽道損傷抗氧化治療的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志， 2012， 19(10)：1069-1073.
  19. 19. Kang JW， Lee SM. Melatonin inhibits type 1 interferon signaling of toll-like receptor 4 via heme oxygenase-1 induction in hepatic ischemia/reperfusion[J]. J Pineal Res， 2012， 53(1)：67-76.
  20. 20. Hsu JT， Kuo CJ， Chen TH， et al. Melatonin prevents hemorrhagic shock-induced liver injury in rats through an Akt-dependent HO-1 pathway[J]. J Pineal Res， 2012， 53(4)：410-416.
  21. 21. Cheshchevik VT， Lapshina EA， Dremza IK， et al. Rat livermitochondrial damage under acute or chronic Carbon tetrachloride-induced intoxication：protection by melatonin and cranberry flavo-noids[J]. Toxicol Appl Pharmacol， 2012， 261(3)：271-279.
  22. 22. Wang H， Xu DX， Lv JW， et al. Melatonin attenuates lipopolysaccharide (LPS)-induced apoptotic liver damage in D-galactosamine-sensitized mice[J]. Toxicology， 2007， 237(1-3)：49-57.
  23. 23. El-Missiry MA， Fayed TA， El-Sawy MR， et al. Ameliorative effect of melatonin against gamma-irradiation-induced oxidativestress and tissue injury[J]. Ecotoxicol Environ Saf， 2007， 66(2)：.
  24. 24. Jahovic N， Cevik H， Sehirli AO， et al. Melatonin prevents methotrexate-induced hepatorenal oxidative injury in rats[J]. J Pineal Res， 2003， 34(4)：282-287.
  25. 25. Korkmaz GG， Uzun H， Cakatay U， et al. Melatonin ameliorates oxidative damage in hyperglycemia-induced liver injury[J]. Clin Invest Med， 2012， 35(6)：E370-E377.
  26. 26. Reiter RJ. Melatonin：that ubiquitously acting pineal hormone[J]. Physiology， 1991， 6(5)：223-227.
  27. 27. López PM， Fiñana IT， De Agueda MC， et al. Protective effect of melatonin against oxidative stress induced by ligature of extra-hepatic biliary duct in rats：comparison with the effect of S-adenosyl-L-methionine[J]. J Pineal Res， 2000， 28(3)：143-149.
  28. 28. -286.