目的 探討經(jīng)肌肉注射轉(zhuǎn)染pEGFP-C1/Akt的鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）對后肢缺血大鼠血管生成的影響。方法 Wistar大鼠30只，制成雙后肢缺血模型，雙盲法隨機分為基因治療組（肌注經(jīng)pEGFP-C1/Akt轉(zhuǎn)染的MSCs）、非基因治療組（肌注MSCs）及對照組（肌注PBS液）。造模前、造膜后即刻及MSCs移植后1~7 d內(nèi),每天用紅外線皮溫儀測定大鼠后肢皮溫變化。28 d時經(jīng)動脈造影觀察后肢血管生成情況； 免疫組化染色檢測后肢毛細血管密度； 逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）和Western blot法檢測后肢肌肉組織中Akt及血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）的 mRNA和蛋白的表達。結(jié)果 移植3 d后基因治療組大鼠后肢皮溫升高明顯。28 d時經(jīng)動脈造影觀察基因治療組后肢側(cè)支血管生成明顯； 熒光顯微鏡觀察有綠色熒光細胞在基因治療組的內(nèi)收肌和半膜肌分布。毛細血管密度： 基因治療組為（7.1±0.3）個/高倍鏡，非基因治療組為（4.2±0.4）個/高倍鏡，對照組為（1.3±0.2）個/高倍鏡，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。Akt及VEGF的 mRNA和蛋白的表達分析: 基因治療組Akt mRNA(2.44±0.14)和蛋白（1.12±0.13）及VEGF mRNA（1.11±0.11）和蛋白（0.97±0.13）表達水平均明顯高于非基因治療組Akt mRNA(1.58±0.13)和蛋白（0.78±0.12）及VEGF mRNA（0.78±0.14）和蛋白（0.67±0.11）以及對照組Akt mRNA(0.64±0.11)和蛋白（0.36±0.12）及VEGF mRNA（0.56±0.11）和蛋白（0.33±0.13）的表達水平（P＜0.01），后2組間比較差異亦均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論 pEGFP-C1/Akt體外轉(zhuǎn)染骨髓MSCs促進后肢缺血大鼠血管生成的效果優(yōu)于單純MSCs治療，為基因轉(zhuǎn)染MSCs治療缺血性疾病提供可能。