目的 建立C57/BL6小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)的體外分離和培養(yǎng)體系,探討酒精及其代謝物對MSCs的毒性。方法 從C57/BL6小鼠的股骨骨髓中分離MSCs,通過優(yōu)化細胞的培養(yǎng)方法進行有效培養(yǎng)、傳代,最終獲得純度較高的MSCs,并對第4代細胞進行CD90和CD34免疫組織化學(xué)染色鑒定。對第2代細胞以4×105個/ml密度接種于96孔板,每孔200 μl,第2天以用乙醇及乙醛進行染毒,劑量設(shè)計為乙醇5.7、17.0、50.0、100.0、150.0 mmol/L, 乙醛4.5、0.9、0.18、0.036、0.007 2、0.001 44、0.000 288 mmol/L,對照組為MSCs以不加乙醇及乙醛的10%胎牛血清的αMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)。3 d后MTT檢測細胞增殖活性。結(jié)果 MSCs在前6代表現(xiàn)出較好的穩(wěn)定性和旺盛的自我增殖能力,免疫組織化學(xué)染色顯示第4代MSCs CD90呈陽性、CD34呈陰性。MTT檢測乙醇在17.0、100.0及150.0 mmol/L時出現(xiàn)細胞增殖抑制,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);乙醛gt;0.18 mmol/L時隨著濃度增加細胞增殖力減弱,在4.5 mmol/L時出現(xiàn)了細胞增殖抑制,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05) 。結(jié)論 優(yōu)化培養(yǎng)體系能有效分離和培養(yǎng)MSCs,乙醇和乙醛均能抑制其增殖,表現(xiàn)出毒性作用,乙醛的毒性作用較乙醇強,其造成的損傷更不容忽視。
【摘要】 乙醛脫氫酶(acetaldehyde dehydrogenase,ALDH)廣泛存在于不同組織中,是一類具有高度氧化活性的胞漿酶類。隨著腫瘤干細胞理論的提出,ALHD1被發(fā)現(xiàn)為多種腫瘤干細胞的表面標(biāo)志,在腫瘤的診斷、治療、判斷預(yù)后等方面發(fā)揮一定作用。現(xiàn)就ALDH1在不同腫瘤的具體作用及在放化療耐藥方面的機制作一綜述。
目的研究乙醛脫氫酶2(ALDH2)基因多態(tài)性與與頸動脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)的關(guān)系。 方法從2013年4月-2014年2月體檢的310例頸動脈IMT增厚者(IMT增厚組)和280例頸動脈IMT正常的健康者(對照組)外周血中提取DNA,采用DNA微陣列芯片法檢測兩組ALDH2基因多態(tài)性。 結(jié)果IMT增厚組與對照組基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡。與正常對照組相比,頸動脈IMT增厚組ALDH2基因AA/AG基因型和A等位基因頻率(分別為67.4%、37.9%)明顯高于對照組(分別為41.1%、22.3%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001);logistic回歸顯示ALDH2基因多態(tài)性與頸動脈IMT增厚相關(guān)[OR=2.381,95%CI(1.356,4.213),P=0.004]。 結(jié)論ALDH2基因多態(tài)性與中國四川漢族人群頸動脈IMT增厚相關(guān),ALDH2基因多態(tài)性可能在頸動脈IMT增厚遺傳易感性方面具有重要作用。
目的 探討乳腺癌組織中乙醛脫氫酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)及性別決定區(qū)Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)的表達情況及其臨床意義。 方法使用免疫組織化學(xué)法檢測2017–2019年期間在南陽市中心醫(yī)院就診的80例乳腺癌患者的癌組織及其癌旁組織中ALDH1及SOX2 蛋白表達情況,并分析二者的相關(guān)性以及二者與乳腺癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果ALDH1和SOX2蛋白表達陽性率在乳腺癌組織中高于在癌旁組織中(75.0%比30.0%,P<0.05;62.5%比21.3%,P<0.05)。乳腺癌組織中ALDH1及SOX2蛋白陽性表達與乳腺癌患者的腫瘤組織學(xué)分級、TNM分期和腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)有關(guān)(P<0.05);經(jīng)Spearman相關(guān)性分析,ALDH1蛋白與SOX2蛋白表達呈正相關(guān)(rs=0.507,P<0.001)。將單因素分析有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo)以及結(jié)合與臨床有關(guān)的特征指標(biāo)進行多因素logistic 回歸分析,結(jié)果顯示,乳腺癌患者的腫瘤大小、組織學(xué)分級、TNM分期、腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)以及ALDH1和SOX2蛋白表達均與隨訪后達到無病生存無關(guān)(P>0.05,可能受樣本量少及發(fā)生終點事件例數(shù)較少影響所致);但是采用Kaplan-Meier法繪制的生存曲線經(jīng)log-rank檢驗分析結(jié)果顯示,ALDH1和SOX2蛋白陽性表達患者的累積無病生存率低于陰性表達者(P<0.05)。結(jié)論ALDH1和SOX2蛋白在乳腺癌組織中高表達且二者呈正相關(guān);生存曲線log-rank檢驗顯示乳腺癌患者癌組織中ALDH1和SOX2蛋白陽性表達者有預(yù)后較差的趨勢。