目的 探討酶切富集PCR 法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌( NSCLC) 患者胸腔積液表皮生長(zhǎng)因子受體基因( EGFR) 外顯子19 缺失和外顯子21 L858R 突變的臨床意義。方法 采用EGFR 基因突變酶切富集及非酶切富集PCR 法對(duì)30 例NSCLC 患者胸腔積液游離核酸EGFR 基因外顯子19 缺失和外顯子21 L858R 突變進(jìn)行分析。結(jié)果 30 例NSCLC 患者中, 酶切富集PCR 法分別檢出EGFR 基因外顯子19 缺失10 例( 33. 3% ) 和外顯子21 L858R 突變5 例( 1. 7% ) , 非酶切富集PCR 法則僅能分別檢出6 例( 20. 0%) 和1 例( 3. 3% ) ; 兩種方法檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P = 0. 032) 。在接受吉非替尼治療的4 例患者中, 2 例檢出EGFR 基因突變患者治療后腫瘤均部分緩解。結(jié)論 酶切富集PCR 法可以高效、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確地檢測(cè)NSCLC 患者胸腔積液游離核酸EGFR 基因突變, 可能成為臨床NSCLC 患者選擇EGFR 酪氨酸激酶抑制劑治療的預(yù)測(cè)方法。
目的 研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞( BMMSC) 對(duì)非特異性間質(zhì)性肺炎( NSIP) 患者異常肺成纖維細(xì)胞的影響, 探討B(tài)MMSC 在間質(zhì)性肺纖維化的治療機(jī)制。方法 體外原代培養(yǎng)人BMMSC、NSIP 患者的肺成纖維細(xì)胞, 以及正常的肺成纖維細(xì)胞。BMMSC 和正常肺成纖維細(xì)胞分別與NSIP肺成纖維細(xì)胞以Transwell 孔共培養(yǎng), 24 h后留取上清, 采用ELISA 法檢測(cè)上清中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 ( TGF-β1 ) 和干擾素誘導(dǎo)蛋白10( IP-10) 等細(xì)胞因子水平, 液相芯片技術(shù)檢測(cè)上清中IL-6、IL-8、單核細(xì)胞趨化蛋白1( MCP-1) 等炎性因子水平。Transwell 孔共培養(yǎng)48 h后提取肺成纖維細(xì)胞蛋白, Western blot 檢測(cè)肺成纖維細(xì)胞分泌的α平滑肌肌動(dòng)蛋白( α-SMA) 的表達(dá)水平。結(jié)果 NSIP 肺成纖維細(xì)胞與正常肺成纖維細(xì)胞相比, 能夠高分泌炎性因子IL-6、IL-8 和趨化因子MCP-1, 高表達(dá)α-SMA。 BMMSC 與NSIP 肺成纖維細(xì)胞以Transwell 孔共培養(yǎng)24 h后, TGF-β1及IP-10高表達(dá), 顯著下調(diào)NSIP 肺成纖維細(xì)胞高水平分泌的IL-6、IL-8 和MCP-1炎性因子水平, 并明顯下調(diào)NSIP 肺成纖維細(xì)胞α-SMA的高表達(dá)。結(jié)論 間充質(zhì)干細(xì)胞能夠下調(diào)NSIP肺成纖維細(xì)胞高水平分泌的多種炎性細(xì)胞因子, 抑制NSIP肺成纖維細(xì)胞α-SMA 的高表達(dá)。