目的 探討生理范圍內(nèi)的流動切應(yīng)力作用于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)后,其定向內(nèi)皮誘導(dǎo)所得細(xì)胞的組織纖溶酶原激活物(t-PA)信使核糖核酸(mRNA)表達(dá)水平的變化。 方法 體外培養(yǎng)大鼠MSCs,將其制作為細(xì)胞爬片,待其培養(yǎng)至80%融合后,取其中26張爬片放入流室中,施加5dyn/cm2的切應(yīng)力3h,再定向內(nèi)皮誘導(dǎo)10d后,取出其中13張(組Ⅰ),另13張(組Ⅱ)繼續(xù)培養(yǎng)3~4d后,按1∶3的比例傳代。同時(shí)設(shè)定向內(nèi)皮誘導(dǎo)前后均不施加切應(yīng)力的MSCs為對照組(n=13)。用熒光實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測3組的t-PA mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果 大鼠MSCs定向內(nèi)皮誘導(dǎo)7d后,具有典型內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)。組Ⅰ和組Ⅱ的t-PA mRNA表達(dá)水平與對照組比較明顯升高 (P<0.05),組Ⅱ雖較組Ⅰ稍降低(P>0.05),但仍明顯高于對照組(P<0.05)。 結(jié)論 流動切應(yīng)力對MSCs體外誘導(dǎo)所得內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作用,并可隨著細(xì)胞的傳代而得以保持。這一結(jié)果將為動脈粥樣硬化疾病的治療和心血管組織工程種子細(xì)胞的選擇提供新的理論依據(jù)。
目的 探討肺減容術(shù)(LVRS)對肺氣腫兔膈肌骨架蛋白信使核糖核酸(mRNA)表達(dá)的影響。方法 40只家兔隨機(jī)分為正常對照組、肺氣腫組、單純開胸組和LVRS組,每組10只。正常對照組氣管內(nèi)滴入生理鹽水,余3組采用煙熏加氣管內(nèi)滴入0.4%木瓜蛋白酶0.5ml/kg誘發(fā)肺氣腫,建立肺氣腫模型,其中肺氣腫組不作手術(shù)干預(yù);單純開胸組僅行胸骨正中切口進(jìn)入雙側(cè)胸膜腔,不行LVRS;LVRS組胸骨正中開胸后行雙側(cè)LVRS。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測膈肌組織中肌聯(lián)蛋白(titin)和伴肌動蛋白(nebulin)mRNA的表達(dá)。結(jié)果 與正常對照組比較,肺氣腫組和單純開胸組膈肌組織肌聯(lián)蛋白mRNA和伴肌動蛋白mRNA表達(dá)均顯著降低(P〈0.01),LVRS組亦降低(P〈0.05),但高于肺氣腫組和單純開胸組(P〈0.05)。結(jié)論 LVRS能夠使肺氣腫兔膈肌組織中肌聯(lián)蛋白和伴肌動蛋白得到明顯恢復(fù),這可能是術(shù)后膈肌功能得以恢復(fù)的分子基礎(chǔ)。