目的 探討生理范圍內(nèi)的流動(dòng)切應(yīng)力作用于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）后，其定向內(nèi)皮誘導(dǎo)所得細(xì)胞的組織纖溶酶原激活物（t-PA）信使核糖核酸（mRNA）表達(dá)水平的變化。 方法 體外培養(yǎng)大鼠MSCs，將其制作為細(xì)胞爬片，待其培養(yǎng)至80%融合后，取其中26張爬片放入流室中，施加5dyn/cm2的切應(yīng)力3h，再定向內(nèi)皮誘導(dǎo)10d后，取出其中13張(組Ⅰ)，另13張(組Ⅱ)繼續(xù)培養(yǎng)3~4d后，按1∶3的比例傳代。同時(shí)設(shè)定向內(nèi)皮誘導(dǎo)前后均不施加切應(yīng)力的MSCs為對(duì)照組（n=13）。用熒光實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)3組的t-PA mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果 大鼠MSCs定向內(nèi)皮誘導(dǎo)7d后，具有典型內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)。組Ⅰ和組Ⅱ的t-PA mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組比較明顯升高 (P＜0.05)，組Ⅱ雖較組Ⅰ稍降低(P＞0.05)，但仍明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。 結(jié)論 流動(dòng)切應(yīng)力對(duì)MSCs體外誘導(dǎo)所得內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作用，并可隨著細(xì)胞的傳代而得以保持。這一結(jié)果將為動(dòng)脈粥樣硬化疾病的治療和心血管組織工程種子細(xì)胞的選擇提供新的理論依據(jù)。
目的 探討肺減容術(shù)（LVRS）對(duì)肺氣腫兔膈肌骨架蛋白信使核糖核酸（mRNA）表達(dá)的影響。方法 40只家兔隨機(jī)分為正常對(duì)照組、肺氣腫組、單純開(kāi)胸組和LVRS組，每組10只。正常對(duì)照組氣管內(nèi)滴入生理鹽水，余3組采用煙熏加氣管內(nèi)滴入0.4％木瓜蛋白酶0.5ml／kg誘發(fā)肺氣腫，建立肺氣腫模型，其中肺氣腫組不作手術(shù)干預(yù)；單純開(kāi)胸組僅行胸骨正中切口進(jìn)入雙側(cè)胸膜腔，不行LVRS；LVRS組胸骨正中開(kāi)胸后行雙側(cè)LVRS。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測(cè)膈肌組織中肌聯(lián)蛋白（titin）和伴肌動(dòng)蛋白（nebulin）mRNA的表達(dá)。結(jié)果 與正常對(duì)照組比較，肺氣腫組和單純開(kāi)胸組膈肌組織肌聯(lián)蛋白mRNA和伴肌動(dòng)蛋白mRNA表達(dá)均顯著降低（P〈0.01），LVRS組亦降低（P〈0.05），但高于肺氣腫組和單純開(kāi)胸組（P〈0.05）。結(jié)論 LVRS能夠使肺氣腫兔膈肌組織中肌聯(lián)蛋白和伴肌動(dòng)蛋白得到明顯恢復(fù)，這可能是術(shù)后膈肌功能得以恢復(fù)的分子基礎(chǔ)。
目的 檢測(cè)炎前因子mRNA在增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy, PVR)中的表達(dá)情況，證實(shí)其在PVR發(fā)病中的作用。 方法 收集14例不同分級(jí)的PVR患者玻璃體切割術(shù)中所取出的增生膜，石蠟包埋切片，用生物素標(biāo)記的寡核苷酸探針進(jìn)行原位雜交，檢測(cè)IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表達(dá)，兩例角膜移植后的供體眼作為正常對(duì)照。 結(jié)果 共有5例樣本有陽(yáng)性表達(dá)。3例增生膜中IL-1βmRNA表達(dá)，3例表達(dá)了IL-6 mRNA，1例表達(dá)了IL-8 mRNA，3例表達(dá)TNF-αmRNA。其中1例既表達(dá)了IL-1β又表達(dá)了IL-6 mRNA，1例IL-1β、IL-8和TNF-αmRNA三者均表達(dá)，2例有IL-6和TNF-αmRNA兩者表達(dá)。正常視網(wǎng)膜未檢測(cè)到炎前因子mRNA的表達(dá)。 結(jié)論 IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α參予了PVR增生膜的形成過(guò)程。 (中華眼底病雜志, 2002, 18: 286-288)
目的 了解在視覺(jué)發(fā)育可塑期，NMDA-R1受體基因的mRNA構(gòu)型與斜 視性弱視貓視皮層神經(jīng)元細(xì)胞水平表達(dá)減少有關(guān)的。 方法 同胞 正常貓和斜視性弱視貓各兩對(duì)(共4只)。采用一系列地高辛核酸分子探針做貓腦片原位雜交 ，檢測(cè)NMDA-R1不同mRNA構(gòu)型在視皮層的表達(dá)情況。 結(jié)果 與正常貓相比，NMDA-R1 mRNAldquo;Panrdquo;探針和R1-a，R1-b，R1-1構(gòu)型探針在斜視性弱視貓視皮層的表達(dá)顯著減少，主要在第IV層。R1-3構(gòu)型的表達(dá)在斜視性弱視貓視皮層比正常貓?jiān)黾?，主要在第V-VI層。R1-2和R1-4構(gòu)型的表達(dá)在正常貓和斜視貓視皮層的差異不顯著。 結(jié)論 斜視性弱視貓視皮層NMDA-R1 mRNA特異構(gòu)型的轉(zhuǎn)錄 抑制導(dǎo)致受體蛋白水平表達(dá)的改變。 （中華眼底病雜志，2000，16：71-138）
目的：研究視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷狀況下視紫紅質(zhì)基因mRNA表達(dá)水平的變化規(guī)律及其與形態(tài)學(xué)改變的關(guān)系。 方法：應(yīng)用原位雜交和電鏡技術(shù)對(duì)光化學(xué)損傷大鼠視網(wǎng)膜視紫紅質(zhì)基因mRNA表達(dá)情況及視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)損傷性改變進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。 結(jié)果：視紫紅質(zhì)mRNA原位雜交信號(hào)主要分布于視網(wǎng)膜光感受細(xì)胞層，尤其是其內(nèi)段和外段；隨連續(xù)光照時(shí)間的延續(xù)，其表達(dá)迅速下降，且先于視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)的損傷性改變；同一視網(wǎng)膜中，上方及后極部雜交信號(hào)的減弱較下方和周邊部更為明顯。 結(jié)論：視紫紅質(zhì)基因mRNA表達(dá)水平降低可能為光化學(xué)性視網(wǎng)膜損傷的早期信號(hào)。 （中華眼底病雜志，1997，13：228-230）