目的 研究巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1β（MIP-1β）在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）各病理類型中表達(dá)及其與腫瘤的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法 采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）擴(kuò)增38例新鮮NSCLC癌組織標(biāo)本MIP-1β mRNA，半定量分析各病理類型MIP-1β基因表達(dá)水平。用免疫組化法（IHC）對(duì)66例NSCLC石蠟肺組織標(biāo)本的MIP-1β進(jìn)行檢測(cè)，并通過(guò)著色面積和著色程度評(píng)估陽(yáng)性率；比較不同病理類型、TNM分期和有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織中MIP-1β蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果 MIP-1β mRNA表達(dá)在鱗癌和腺癌間比較無(wú)顯著差異（1.23±0.29和1.25±0.26），但均顯著高于支氣管肺泡細(xì)胞癌（0.86±0.03）。在肺鱗癌和腺癌的大多數(shù)癌細(xì)胞胞漿中有MIP-1β蛋白表達(dá)，在支氣管肺泡細(xì)胞癌無(wú)明顯表達(dá)；MIP-1β蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在腺癌和鱗癌無(wú)顯著差異（69.7%比58.6%）。MIP-1β蛋白在NSCLC不同TNM分期中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為Ⅰ期74.2%、Ⅱ期29.4%、Ⅲ期85.7%，Ⅰ期和Ⅲ期比較無(wú)顯著差異（Pgt;0.05），但二者陽(yáng)性率均顯著高于Ⅱ期（Plt;0.05）。MIP-1β在有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤中表達(dá)陽(yáng)性率分別為45.8%和76.3%，二者有顯著差異。結(jié)論 MIP-1β可在肺癌腫瘤細(xì)胞表達(dá)，并與腫瘤的病理類型、TNM分期和有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。
目的 觀察水通道蛋白1( AQP-1) 在急性過(guò)敏性哮喘小鼠肺組織表達(dá)的變化, 以及乙酰唑胺( AZ) 對(duì)AQP-1 表達(dá)的影響。方法 40 只C57BL/6 小鼠隨機(jī)分對(duì)照組( A 組) 、AZ 大劑量干預(yù)組( 300 mg/kg, B 組) 、AZ 中劑量干預(yù)組( 200 mg/kg, C 組) 、AZ 小劑量干預(yù)組( 100 mg/kg, D 組) 和哮喘組( E 組) , 每組8 只。干預(yù)組在激發(fā)階段給予不同劑量的AZ 腹腔注射。結(jié)果 ①E 組肺組織的濕干重比值比A 組明顯增高( P lt;0. 05) ; B、C、D組肺組織的濕干重比值較E 組顯著減低( P lt;0. 05) , 與劑量呈負(fù)相關(guān)性。②E 組BALF 中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸粒細(xì)胞數(shù)和IL-5 水平均高于A 組( P lt; 0. 05) ,IFN-γ水平低于A 組( P lt;0. 05) , 治療后細(xì)胞總數(shù)、嗜酸粒細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞均明顯下降( P lt;0. 05) , 且與劑量呈正相關(guān)性。③E 組AQP-1 在氣管黏膜上皮、微血管內(nèi)膜上皮、支氣管周圍血管床及炎癥細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá), 其表達(dá)水平明顯高于A 組( P lt;0. 01) , 使用AZ 干預(yù)后表達(dá)明顯低于E 組( P lt;0. 05) , 下降的幅度與劑量呈正相關(guān)性; 但AQP-1 mRNA 檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯差異( P gt; 0. 05) 。結(jié)論 ①AQP-1 在急性哮喘小鼠肺組織內(nèi)及炎癥細(xì)胞上過(guò)度表達(dá), E 組呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。②AZ 對(duì)AQP-1 有顯著的抑制作用, 可明顯改善小鼠肺部的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變, 且呈劑量依賴性。③AQP-1蛋白質(zhì)在各組中表達(dá)差異較大, 但AQP-1 mRNA 無(wú)明顯差異, 提示乙酰唑胺對(duì)AQP-1 的影響可能是在轉(zhuǎn)錄后的水平上。
一直以來(lái)β2 受體激動(dòng)劑在支氣管哮喘的防治領(lǐng)域起著非常突出的作用, 但是由于長(zhǎng)期重復(fù)使用后可致β2 腎上腺素能受體( β2 -adrenergic receptor, β2 AR) 減敏, 導(dǎo)致臨床使用受到很大的限制。雖然現(xiàn)在已經(jīng)開(kāi)發(fā)出了長(zhǎng)效的β2 受體激動(dòng)劑, 但是也可因同樣的原因需同時(shí)使用糖皮質(zhì)激素以避免其可能的減敏 , 因此探討β2 AR 減敏的機(jī)制就顯得尤為必要。泛素系統(tǒng)包括泛素、多種酶、26S 蛋白酶體等, 細(xì)胞內(nèi)許多蛋白都通過(guò)泛素化參與生命活動(dòng)。有研究顯示β2 AR 的泛素化與其內(nèi)化和降解有關(guān)。本文就β2 AR 減敏的可能機(jī)制作一綜述。
目的 構(gòu)建β2 受體( β2R)下調(diào)哮喘動(dòng)物模型, 以研究β2R下調(diào)及其激素保護(hù)作用的機(jī)制。方法 32 只BALB/ c 小鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、哮喘組、β2R下調(diào)組和地塞米松組, 每組8 只。哮喘組、β2R下調(diào)組和地塞米松組分別于實(shí)驗(yàn)的第0、14和21 d 腹腔注射卵白蛋白( OVA) 和氫氧化鋁的混懸液200 μL, 第28 d 開(kāi)始連續(xù)1 周( 30 min/d) 霧化吸入1% OVA( W/V) 溶液;β2R下調(diào)組和地塞米松組在最后1 周每天霧化吸入OVA 之前腹腔注射60 μg 沙丁胺醇及霧化吸入0. 01% 沙丁胺醇30 min; 地塞米松組同時(shí)予以腹腔注射地塞米松5 mg·kg-1·d - 1 , 連續(xù)7 d。對(duì)照組腹腔注射等量的磷酸鹽緩沖液( PBS) , 以PBS霧化吸入。用體積描記箱測(cè)定各組小鼠氣道阻力。測(cè)定BALF 中白細(xì)胞總數(shù)和分類計(jì)數(shù)。ELISA 法檢測(cè)BALF 中IL-4、IFN-γ以及血清總IgE 濃度。提取小鼠肺組織總蛋白, 免疫印跡實(shí)驗(yàn)測(cè)定β2R總量, 放射配基結(jié)合實(shí)驗(yàn)測(cè)定β2膜受體數(shù)量。結(jié)果 哮喘組、β2R下調(diào)組與對(duì)照組、地塞米松組比較, 高劑量乙酰膽堿激發(fā)下的氣道阻力明顯增高( P lt;0. 01) , BALF 中嗜酸粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞明顯增多( Plt;0. 01) , BALF中IL-4 和血清總IgE 水平顯著增高( Plt;0. 01) , BALF 中IFN-γ水平顯著降低( Plt;0. 01) 。β2R下調(diào)組肺組織β2R 總量和β2 膜受體數(shù)量均顯著低于其余三組( Plt;0. 01) , 對(duì)照組、哮喘組、地塞米松組之間無(wú)顯著差異。結(jié)論 在傳統(tǒng)的OVA 致敏激發(fā)哮喘動(dòng)物模型基礎(chǔ)上, 采用腹腔注射結(jié)合霧化吸入沙丁胺醇的方法成功構(gòu)建了β2R下調(diào)的哮喘動(dòng)物模型。地塞米松對(duì)β2R下調(diào)具有保護(hù)作用。