目的 通過(guò)線栓法制備大鼠慢性后肢缺血模型，將其與急性后肢缺血模型進(jìn)行比較研究。方法 采用線栓法制備Lewis大鼠慢性后肢缺血模型，分別于術(shù)后第7、14、28、42及49天進(jìn)行激光多普勒血流分析及血管造影。每組動(dòng)物在血管造影后處死，分別取其健側(cè)和患側(cè)股四頭肌和腓腸肌行HE染色及α-actin免疫組織化學(xué)染色，并計(jì)算小動(dòng)脈密度。結(jié)果 慢性后肢缺血模型組動(dòng)物術(shù)后未出現(xiàn)明顯的跛行和肢體壞死。血流分析發(fā)現(xiàn)，慢性后肢缺血模型在術(shù)后第49天仍處于缺血狀態(tài)。后肢肌肉組織病理學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)急性壞死和肌肉纖維化的表現(xiàn)。術(shù)后第7天，慢性缺血組股四頭肌的小動(dòng)脈密度低于急性缺血組（0.015 2比0.036 4）。結(jié)論 線栓法制備大鼠慢性后肢缺血模型與目前采用的急性動(dòng)物后肢缺血模型制備方法有顯著的不同， 其缺血肢體較少受到代償機(jī)制的影響且缺血時(shí)間維持較長(zhǎng)，此為進(jìn)一步研究缺血后血管新生的機(jī)理和治療嚴(yán)重的下肢缺血提供了一種新的動(dòng)物模型。
目的 利用細(xì)胞示蹤技術(shù)探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）治療慢性后肢缺血的相關(guān)機(jī)理。方法 采用密度梯度離心法結(jié)合直接貼壁法分離和培養(yǎng)大鼠MSCs，并以5-溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU）標(biāo)記。采用線栓法制備8只Lewis大鼠慢性后肢缺血模型，將其隨機(jī)均分為MSCs移植組和對(duì)照組，分別于患側(cè)后肢肌肉注射MSCs和生理鹽水。分別于移植術(shù)后第7天和第14天，對(duì)其進(jìn)行臨床觀察、后肢血流量測(cè)定及后肢血管造影，再于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，取患側(cè)后肢股四頭肌和腓腸肌，行HE染色及BrdU免疫組化染色。結(jié)果 移植術(shù)后14d，8只大鼠全部成活，移植部位均無(wú)壞死和腫瘤形成；MSCs移植組大鼠患側(cè)/健側(cè)后肢的血流灌注比值明顯增高（1.773比1.279），而血管造影結(jié)果提示2組大鼠的側(cè)支血管數(shù)量比值未見顯著增加（0.908比0.835）。HE染色結(jié)果示2組大鼠的股四頭肌及腓腸肌并未發(fā)生特殊的病理學(xué)變化。BrdU免疫組化結(jié)果顯示，陽(yáng)性顆粒定位為股四頭肌及腓腸肌的間質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞；且MSCs的分布存在差異，移植術(shù)后7d腓腸肌內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞所占比例明顯高于股四頭肌，而14d時(shí)則相反。結(jié)論 MSCs移植在術(shù)后早期可以提高血流灌注量，但這并非為增加了側(cè)支血管數(shù)量使然，MSCs移植后所引起的旁分泌效應(yīng)可能在術(shù)后早期起著重要的作用。
目的應(yīng)用激光多普勒血流探測(cè)儀(LDF)和激光多普勒血流成像儀(LDPI)監(jiān)測(cè)Lewis大鼠后肢急性缺血模型血流和血壓的動(dòng)態(tài)變化，探討大鼠后肢急性缺血后血流變化特點(diǎn)。方法切除大鼠左后肢股動(dòng)脈制備急性后肢缺血模型，于術(shù)后2、7、14、28及49 d對(duì)手術(shù)側(cè)和非手術(shù)側(cè)肢體采用LDF進(jìn)行血流、血壓檢測(cè)，于術(shù)后7 d采用LDPI進(jìn)行血流檢測(cè)。結(jié)果所有大鼠術(shù)后均成活，未發(fā)現(xiàn)后肢壞死; 在術(shù)后14 d內(nèi)手術(shù)側(cè)后肢平均分為2分，在49 d平均分為1分。大鼠手術(shù)側(cè)和非手術(shù)側(cè)肢體血流比值在術(shù)后2 d由術(shù)前的1上升至1.31±0.439(P=0.021),術(shù)后7 d和14 d分別為0.82±0.538和0.93±0.294，兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.502)，但均明顯低于術(shù)后2 d的值(P=0.032和P=0.019); 術(shù)后28 d下降到最低點(diǎn)(0.41±1.970)，明顯低于術(shù)后2、7和14 d值(P=0.004、P=0.007和P=0.006); 在術(shù)后49 d手術(shù)側(cè)后肢血流恢復(fù)到接近術(shù)前值(0.98±0.093)，明顯低于術(shù)后2 d（P=0.010）而高于術(shù)后28 d值(P=0.005)，與術(shù)后7 d和14 d的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.126和P=0.382)。大鼠手術(shù)側(cè)和非手術(shù)側(cè)肢體血壓比值術(shù)后2 d由術(shù)前的1明顯下降至0.47±0.375(P=0.031); 術(shù)后7 d繼續(xù)下降至0.44±0.118，與術(shù)后2 d比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.203); 術(shù)后14 d下降到最低點(diǎn)(0.35±0.115)，明顯低于術(shù)后2 d和7 d值(P=0.001和P=0.036); 術(shù)后28 d開始上升(0.54±0.146)，明顯高于術(shù)后14 d值(P=0.008)，但與術(shù)后2 d(P=0.493)和7 d(P=0.551)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 術(shù)后49 d恢復(fù)接近術(shù)前值(0.97±0.094)，明顯高于術(shù)后2、7、14和28 d值(P=0.013、P=0.021、P=0.002和P=0.031)。結(jié)論切除大鼠后肢股動(dòng)脈及分支的方法制備后肢急性缺血模型，在術(shù)后14~28 d患肢缺血處于最嚴(yán)重階段。LDF和LDPI可以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)肢體血流及血壓的變化，對(duì)監(jiān)測(cè)大鼠后肢術(shù)后缺血的動(dòng)態(tài)演變過(guò)程有著重要的作用。