目的克隆人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(hVEGF)基因VEGF165片段,構(gòu)建pcDNA3.1/hVEGF165, 觀察其在COS-7細(xì)胞中的表達(dá),為基因治療缺血性心臟病的研究奠定基礎(chǔ)。方法從合法引產(chǎn)的胎兒心肌組織中提取總核糖核酸(RNA),應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法獲得hVEGF165基因,將其重組入T載體,聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法鑒定并測(cè)序,雙酶切后克隆入真核表達(dá)載體pcDNA3.1/myc-his-B中,構(gòu)建pcDNA3.1/hVEGF165重組體。用脂質(zhì)體介導(dǎo)將其轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞,蛋白印跡(Westernblotting)法檢測(cè)rhVEGF165的表達(dá)蛋白。結(jié)果用RT-PCR方法從胎兒心肌組織中獲得了正確的hVEGF165基因序列,并成功構(gòu)建pcDNA3.1/hVEGF165,且實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞的瞬時(shí)表達(dá)。結(jié)論構(gòu)建的pcDNA3.1/hVEGF165轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞COS-7能夠表達(dá)rhVEGF蛋白。
目的分析無(wú)癥狀新型冠狀病毒（新冠）感染患者心臟瓣膜手術(shù)圍手術(shù)期治療結(jié)果。方法回顧性分析2022年11月—2023年2月中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)附屬第一醫(yī)院心臟大血管外科接受心臟瓣膜置換患者的圍手術(shù)期臨床資料。根據(jù)患者是否感染新冠，將患者分為未感染組和無(wú)癥狀感染組。比較兩組患者圍手術(shù)期相關(guān)數(shù)據(jù)，分析新冠無(wú)癥狀感染對(duì)心臟瓣膜置換手術(shù)治療結(jié)果的影響。結(jié)果共納入66例患者，其中男36例、女30例，平均年齡（58.0±11.1）歲。未感染組51例，無(wú)癥狀感染組15例。2例二尖瓣置換、20例主動(dòng)脈瓣置換、1例雙瓣置換、3例主動(dòng)脈瓣置換加三尖瓣成形、22例二尖瓣置換加三尖瓣成形、18例雙瓣置換加三尖瓣成形。無(wú)癥狀感染患者比未感染患者急診手術(shù)比例更高（26.7% vs. 0.0%，P<0.01）。無(wú)癥狀感染和未感染患者術(shù)中體外循環(huán)時(shí)間、主動(dòng)脈阻斷時(shí)間、呼吸機(jī)輔助時(shí)間、ICU停留時(shí)間、術(shù)后引流量以及術(shù)后相關(guān)并發(fā)癥差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論新冠無(wú)癥狀感染和未感染患者心臟瓣膜手術(shù)的圍手術(shù)期結(jié)果基本一致。