華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"周立奉" 1條結(jié)果
  • 三維培養(yǎng)汗腺腺上皮細(xì)胞形成汗腺樣結(jié)構(gòu)的初步研究

    目的 探索體外構(gòu)建人外泌汗腺樣結(jié)構(gòu)的方法。 方法 取自愿捐獻(xiàn)的正常腋部全層皮膚,分離培養(yǎng)汗腺腺上皮細(xì)胞,倒置相差顯微鏡下觀察。將汗腺腺上皮細(xì)胞以2 × 105 個/cm2 密度接種至Matrigel 凝膠下(A 組)、凝膠上(B 組)、凝膠中(C 組),進(jìn)行三維立體培養(yǎng),激光掃描共聚焦顯微鏡、HE 染色及免疫組織化學(xué)染色觀察有無汗腺樣結(jié)構(gòu)形成。 結(jié)果 原代汗腺分泌部上皮細(xì)胞接種后24 h 可見細(xì)胞貼壁,貼壁細(xì)胞呈梭形,2 ~ 3 d 后細(xì)胞呈多克隆麥粒樣生長,14 d 后細(xì)胞融合呈鋪路石樣生長,融合后的汗腺腺上皮細(xì)胞呈扁平多角形,中間有較大圓形核;第1 代細(xì)胞形態(tài)與原代極為相似;第2 代細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,多數(shù)伸出長偽足;第3 代細(xì)胞多呈星形狀,細(xì)胞體積大,與鄰近細(xì)胞相互融合。A 組汗腺腺上皮細(xì)胞三維立體培養(yǎng)11 d 形成管腔結(jié)構(gòu);B 組汗腺腺上皮細(xì)胞立體培養(yǎng)8 h,細(xì)胞胞漿伸長呈絲狀,與鄰近細(xì)胞相連呈管腔或半管腔形,但細(xì)胞增殖不明顯;C 組汗腺腺上皮細(xì)胞三維立體培養(yǎng)2 ~ 3 d,細(xì)胞分裂增生,增生細(xì)胞彼此緊密排列成管腔結(jié)構(gòu),中間可見明顯腔隙,隨新生細(xì)胞增多,管腔結(jié)構(gòu)逐漸演變?yōu)椴灰?guī)則球形結(jié)構(gòu)。激光掃描共聚焦顯微鏡觀察示C 組形成球形結(jié)構(gòu),細(xì)胞團(tuán)中央有管腔結(jié)構(gòu);球形結(jié)構(gòu)HE 染色示為管腔結(jié)構(gòu),免疫組織化學(xué)染色示角蛋白18、癌胚抗原表達(dá)陽性,與汗腺分泌部管狀結(jié)構(gòu)極為相似。 結(jié)論 汗腺腺上皮細(xì)胞在Matrigel 凝膠中三維立體培養(yǎng)可形成汗腺樣結(jié)構(gòu)。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:05 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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