華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"夏志道" 1條結(jié)果
  • 不同濃度地塞米松對(duì)人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡及Fas/FasL 基因表達(dá)的影響

    目的 糖皮質(zhì)激素會(huì)破壞軟骨,通過(guò)觀察地塞米松對(duì)人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞(human articularchondrocytes,HACs)凋亡及Fas/FasL 基因表達(dá)的影響,探討其促進(jìn)HACs 凋亡的作用機(jī)制。 方法 取行人工膝關(guān)節(jié)置換的膝骨關(guān)節(jié)炎患者自愿捐贈(zèng)軟骨組織,體外分離培養(yǎng)HACs,取第2 代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將HACs 分別置于含濃度為0.125、1.25、12.5、25 及50 μg/mL 地塞米松培養(yǎng)液中,培養(yǎng)48 h 后采用MTT 法選擇地塞米松最佳工作濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。將HACs 分別采用最佳工作濃度地塞米松(實(shí)驗(yàn)組)及不含地塞米松培養(yǎng)液(對(duì)照組)培養(yǎng),0、24、48 h 后行TMRE/Hoechst/Annexin V-FITC/7-AAD 四重染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡,48 h 后行實(shí)時(shí)定量PCR 檢測(cè)Fas/FasL mRNA 表達(dá),0、24、48 h后行免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)Fas/FasL 蛋白表達(dá)。 結(jié)果 25 μg/mL 濃度組細(xì)胞抑制率顯著高于50 μg/mL 濃度組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);與其他濃度組比較,差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);選擇25 μg/mL 濃度作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)工作濃度。培養(yǎng)0、24、48 h,實(shí)驗(yàn)組HACs 凋亡細(xì)胞百分比分別為5.8% ± 0.3%、27.0% ± 2.6%、36.0% ± 3.1%,呈明顯時(shí)間依賴(lài)性(P lt; 0.05)。培養(yǎng)48 h 后實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組Fas mRNA 相對(duì)表達(dá)量分別為(8.93 ± 1.12)× 10—3 及(3.31 ± 0.37)× 10—3,F(xiàn)asLmRNA 相對(duì)表達(dá)量分別為(5.92 ± 0.66)× 10—3 及(2.31 ± 0.35)× 10—3,兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組Fas 及FasL 蛋白表達(dá)逐漸增加,且各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 地塞米松可促進(jìn)HACs 細(xì)胞凋亡及上調(diào)凋亡基因Fas/FasL 表達(dá),為進(jìn)一步探討Fas/FasL 信號(hào)通路在地塞米松促HACs 凋亡中的作用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    發(fā)表時(shí)間:2016-08-31 04:23 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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