華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"彭娜" 1條結(jié)果
  • 營(yíng)養(yǎng)剝奪誘導(dǎo)髓核細(xì)胞Bcl-2/ 腺病毒干擾蛋白3 表達(dá)及線粒體轉(zhuǎn)位的實(shí)驗(yàn)研究

    【摘 要】 目的 通過(guò)營(yíng)養(yǎng)剝奪模擬體內(nèi)髓核細(xì)胞退變微環(huán)境,檢測(cè)Bcl-2/ 腺病毒干擾蛋白3(Bcl-2/adenovirusE1B 19-kDa-interacting protein 3,BNIP3)表達(dá)及線粒體轉(zhuǎn)位情況,為進(jìn)一步探索髓核細(xì)胞退變死亡機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 成年清潔級(jí)SD 大鼠2 只,雌雄不限,體重150 ~ 200 g。體外分離獲取鼠尾椎間盤(pán)髓核細(xì)胞,將傳代后細(xì)胞分別置入正常環(huán)境(對(duì)照組:L-DMEM 培養(yǎng)基、10%FBS、21%O2)和營(yíng)養(yǎng)剝奪環(huán)境(實(shí)驗(yàn)組:DMEM 無(wú)糖無(wú)血清培養(yǎng)基、 1% O2)培養(yǎng)24、48、72 h 后,實(shí)時(shí)熒光定量PCR、細(xì)胞免疫熒光染色及Western blot 檢測(cè)BNIP3 基因及蛋白表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡率及線粒體膜電位。 結(jié)果 實(shí)時(shí)熒光定量PCR、細(xì)胞免疫熒光染色及Western blot 檢測(cè)顯示對(duì)照組細(xì)胞低表達(dá)BNIP3;實(shí)驗(yàn)組隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),BNIP3 表達(dá)呈上升趨勢(shì),且BNIP3 與線粒體相結(jié)合;除培養(yǎng)后24 h 實(shí)驗(yàn)組BNIP3 基因表達(dá)與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)外,其余各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組BNIP3 基因及蛋白表達(dá)與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示,對(duì)照組細(xì)胞凋亡率較低,且細(xì)胞保持較高的線粒體膜電位;而實(shí)驗(yàn)組隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)細(xì)胞凋亡率增加、線粒體膜電位降低,與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 營(yíng)養(yǎng)剝奪可能通過(guò)誘導(dǎo)BNIP3 表達(dá)增加并結(jié)合線粒體導(dǎo)致線粒體功能障礙,最終導(dǎo)致髓核細(xì)胞死亡。

    發(fā)表時(shí)間:2016-08-31 04:22 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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