目的 克隆和構建攜帶人低氧誘導因子-1α（HIF-1α）的Tet-on基因表達系統(tǒng)反應質粒PTRE-HIF-1α。方法 以缺氧的肝癌細胞株HepG2總RNA為模板，進行RT-巢式PCR，獲得HIF-1α的cDNA，克隆入Tet-on基因表達系統(tǒng)反應質粒PTRE2hyg，酶切重組子鑒定。將構建好的PTRE-HIF-1α用脂質體法轉入HepG2Tet-on細胞，在強力霉素的作用下，用RT-PCR及Western blot法鑒定重組質粒的表達。結果 擴增出HIF-1α的cDNA測序結果與Genbank記載完全一致，并成功克隆入PTRE2hyg，將反應質粒PTRE-HIF-1α轉入HepG2Tet-on細胞，可以完整有效表達HIF-1α且受強力霉素的調控。結論 成功克隆和構建攜帶HIF-1α基因的Tet-on基因表達系統(tǒng)反應質粒PTRE-HIF-1α，并證明其表達能在HepG2Tet-on細胞中受強力霉素調控。