目的 將間充質(zhì)干細(xì)胞( MSCs) 作為基因載體, 利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)構(gòu)建高表達(dá)促血管生成素1( Ang1) 基因的MSCs, 回輸體內(nèi)治療炎癥性肺損傷模型, 觀察其肺內(nèi)定位和修復(fù)作用。方法 分離、培養(yǎng)和擴(kuò)增MSCs 至第四代, 經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定, 得到純度較高的MSCs。同時(shí)以三質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染法在293T 細(xì)胞中制備病毒顆粒Lenti-GFP-Ang1, 并轉(zhuǎn)染MSCs, 通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定轉(zhuǎn)染的最佳MOI 和最佳時(shí)間, 通過(guò)RT-PCR 檢測(cè)轉(zhuǎn)染后MSCs 中Ang1 的基因表達(dá), 確定轉(zhuǎn)染成功。以脂多糖霧化吸入的方式誘導(dǎo)小鼠炎癥性肺損傷模型, 設(shè)未處理組為對(duì)照, 設(shè)三組干預(yù)組, 包括攜帶Ang1 的MSCs 組( MSC-Ang1 組) 、單純Ang1 組( Ang1 組) 和單純MSCs 組( MSCs 組) 。觀察并記錄各組生存天數(shù), 計(jì)算生存率并進(jìn)行生存分析; 免疫組化確定外源MSCs 源性細(xì)胞在肺部的表現(xiàn)。結(jié)果 經(jīng)多重純化后,流式細(xì)胞儀鑒定獲得的干細(xì)胞為CD44( + ) 、Sca-1( + ) 、CD31( - ) 和CD45( - ) 的MSCs, 并具有分化潛能。病毒載體構(gòu)建亦通過(guò)鑒定成功。MSCs 株經(jīng)轉(zhuǎn)染后高表達(dá)Ang1 基因, 當(dāng)MOI = 20 時(shí), MSCs 的細(xì)胞活性及轉(zhuǎn)染達(dá)到最佳效果, 經(jīng)熒光檢測(cè)在第5 d 達(dá)表達(dá)高峰。生存率分析顯示MSC-Ang1 組生存率稍高于對(duì)照組, 但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P = 0. 066) 。移植后受損肺組織內(nèi)可見(jiàn)表達(dá)綠色熒光蛋白的肺泡上皮樣細(xì)胞和肺血管內(nèi)皮樣細(xì)胞。結(jié)論 高表達(dá)目的基因Ang1 的MSCs 可通過(guò)基因技術(shù)有效構(gòu)建, 移植體內(nèi)后, 可在肺內(nèi)檢測(cè)到MSCs 的轉(zhuǎn)化修復(fù)。MSCs 可作為治療肺部疾病的基因運(yùn)載工具