【摘要】 電離輻射是有足夠能量使原子發(fā)生電離的輻射形式,也是臨床上為疾病的診斷和治療提供技術(shù)支持的重要方式。人體接受電離輻射后會因劑量的高低和輻照部位的不同產(chǎn)生明顯或潛在的生物學(xué)效應(yīng),對群體健康產(chǎn)生長期的影響?,F(xiàn)結(jié)合輻射的基本概念、常見形式對輻射健康風(fēng)險的衡量與描述方法以及合理規(guī)避輻射的健康風(fēng)險進(jìn)行綜述,為臨床合理運(yùn)用放射線檢查提供借鑒和參考。
目的 構(gòu)建含小鼠血管內(nèi)皮生長因子(mVEGF)的重組慢病毒表達(dá)載體,包裝成病毒顆粒后感染NS-1小鼠骨髓瘤細(xì)胞株,以便進(jìn)一步探索VEGF在骨髓瘤病理生理機(jī)制中的作用。 方法 聚合酶鏈反應(yīng)法擴(kuò)增mVEGF基因,克隆入含嘌呤霉素抗性的pCDH慢病毒表達(dá)載體,構(gòu)建出表達(dá)mVEGF的慢病毒表達(dá)載體pCDH-mVEGF;采用磷酸鈣法將慢病毒系統(tǒng)三質(zhì)粒pCDH-mVEGF、psPAX2、pMD2.G共轉(zhuǎn)染293FT細(xì)胞包裝病毒,分別收集轉(zhuǎn)染后48 h和72 h病毒上清并感染靶細(xì)胞NS-1,初次感染72 h后開始采用嘌呤霉素篩選穩(wěn)定株,篩選2周后采用ELISA法檢測穩(wěn)定株細(xì)胞培養(yǎng)上清中mVEGF的表達(dá),建立出穩(wěn)定高表達(dá)mVEGF的NS-1小鼠骨髓瘤細(xì)胞株。 結(jié)果 成功構(gòu)建重組慢病毒表達(dá)質(zhì)粒pCDH-mVEGF,并包裝成慢病毒顆粒,感染NS-1細(xì)胞株后獲得靶基因的穩(wěn)定高表達(dá)。 結(jié)論 成功構(gòu)建出含mVEGF的慢病毒表達(dá)載體pCDH-mVEGF,慢病毒系統(tǒng)能有效介導(dǎo)目的基因在NS-1小鼠骨髓瘤細(xì)胞株中穩(wěn)定表達(dá),病毒包裝成功并能有效感染NS-1細(xì)胞,為進(jìn)一步探索VEGF在骨髓瘤病理生理機(jī)制中的作用奠定了基礎(chǔ)。