目的 構(gòu)建胰腺癌細(xì)胞生存蛋白(survivin)表達(dá)的RNA干擾(RNAi)抑制載體,并研究其對(duì)survivin表達(dá)的抑制作用。方法 用免疫熒光技術(shù)和RT-PCR檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞PANC-1中survivin及其mRNA的表達(dá),并把survivin基因克隆到T載體進(jìn)行測(cè)序; 構(gòu)建針對(duì)survivin缺失堿基基因和survivin基因的RNAi載體si-svv-1和si-svv-2,用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞PANC-1后,用RT-PCR、DNA梯狀電泳及流式細(xì)胞術(shù)分析比較2種干擾載體對(duì)survivin mRNA表達(dá)的抑制情況和檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果 survivin在胰腺癌細(xì)胞PANC-1中高表達(dá); si-svv-2對(duì)survivin mRNA的表達(dá)抑制率達(dá)(72.43±8.04)%,而si-svv-1為0; si-svv-2能誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞PANC-1的凋亡, 72 h細(xì)胞凋亡率達(dá)(12.36±1.44)%。結(jié)論 本研究成功建立胰腺癌細(xì)胞survivin表達(dá)RNAi抑制載體,該載體可特異有效地抑制胰腺癌細(xì)胞PANC-1 survivin的表達(dá)并誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞PANC-1凋亡。
目的探討γ-射線對(duì)細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)生長(zhǎng)的抑制作用。 方法在體外培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,利用不同劑量的γ-射線對(duì)細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)進(jìn)行照射,并將照射后的原頭節(jié)種植于小白鼠腹腔,4個(gè)月后進(jìn)行剖腹觀察,對(duì)不同照射劑量組(分別為10 Gy、20 Gy、40 Gy、80 Gy)原頭節(jié)種植后所形成棘球蚴的發(fā)生情況、重量、組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,并與不照射(對(duì)照組)作對(duì)比。 結(jié)果經(jīng)過照射后,原頭節(jié)種植于小白鼠腹腔后其棘球蚴發(fā)生率逐步降低,對(duì)照組為100%,10 Gy組為80.0%,20 Gy組為33.3%,40 Gy組為33.3%,80 Gy組為26.7%。剖腹稱重后,各組棘球蚴重量中位數(shù)比較,10 Gy組(35.80 mg)、20 Gy組(0.00 mg)、40 Gy組(0.00 mg)及80 Gy組(0.00 mg)與對(duì)照組(157.80 mg)相比,均明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。實(shí)驗(yàn)組所形成的棘球蚴發(fā)生鈣化。 結(jié)論γ-射線的照射可以抑制原頭節(jié)形成棘球蚴,并可以導(dǎo)致所形成的棘球蚴結(jié)構(gòu)破壞,加快棘球蚴壞死、鈣化的轉(zhuǎn)歸過程。