目的 構(gòu)建腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）綠色熒光蛋白(GFP)融合表達(dá)質(zhì)粒，觀察其融合蛋白的特性。方法 將BDNF cDNA片段插入pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO 真核表達(dá)質(zhì)粒，使其與GFP同處一個(gè)閱讀框架中，測序鑒定后，轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的雪旺細(xì)胞，用免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)印跡(Western botting)觀察外源性目的蛋白的表達(dá)情況，并用該質(zhì)粒活體轉(zhuǎn)染視神經(jīng)切斷的大鼠模型，觀察所表達(dá)外源性蛋白的神經(jīng)保護(hù)作用。結(jié)果 測序證實(shí)質(zhì)粒構(gòu)建成功。Western botting結(jié)果顯示，BDNF-GFP融合蛋白表達(dá)一相對分子質(zhì)量為41times;103大小條帶。熒光顯微鏡下可見BDNF-GFP轉(zhuǎn)染的細(xì)胞發(fā)出綠色熒光，免疫組織化學(xué)染色后，可見綠色熒光與紅色熒光完全重合。轉(zhuǎn)染BDNF-GFP質(zhì)粒和GFP質(zhì)粒的大鼠視神經(jīng)切斷術(shù)后7 d存活視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGC）分別為（1201plusmn;286）、（482plusmn;151）個(gè) /mm2，存活百分比分別為（51.39plusmn;12.24）%和（20.62plusmn;6.46）%；28 d時(shí)存活的RGC分別為（715plusmn;71）、（112plusmn;24）個(gè)/mm2，存活百分比分別為（30.59plusmn;3.04）%和（4.79plusmn;1.03）%。兩組存活百分比比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.144，11.378；P＜0.01）。結(jié)論 BDNF-GFP融合表達(dá)載體可以轉(zhuǎn)錄翻譯為一融合蛋白，該蛋白可自發(fā)綠色熒光，并具有BDNF的生物學(xué)活性。
目的觀察新型冠狀病毒感染（COVID-19）相關(guān)急性黃斑神經(jīng)視網(wǎng)膜病變（AMN）患眼的臨床和多模式影像學(xué)特征。方法回顧性研究。2022年12月20日至2023年1月17日在復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院眼科就診的COVID-19相關(guān)AMN患者29例58只眼納入研究。所有患眼均行最佳矯正視力、眼底彩色照相、紅外眼底照相（IR）、短波長自身熒光（SW-AF）、近紅外自身熒光（NIR-AF）、光相干斷層掃描（OCT）、OCT血管成像（OCTA）檢查。所有患者均予以改善微循環(huán)口服藥物治療；其中，聯(lián)合小劑量糖皮質(zhì)激素口服12例。首診后隨訪1～3個(gè)月，完成1個(gè)月隨訪共19例38只眼。結(jié)果29例患者中，男性9例18只眼，女性20例40只眼；均為雙眼發(fā)病?；颊吣挲g（29.9±9.5）（12～47）歲。發(fā)熱至出現(xiàn)眼部癥狀的時(shí)間為（2.52±2.01）d。58只眼中，合并視網(wǎng)膜棉絨斑、視盤水腫、黃斑旁視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞分別為5、2、1只眼。所有患眼可見深紅棕色黃斑暗區(qū)。IR檢查，中心凹和旁中心凹楔形、類楔形或“花瓣樣”斑片狀暗區(qū)。SW-AF檢查，未見明顯異常39只眼；與IR一致的弱自身熒光暗區(qū)19只眼。NIR-AF檢查，均可見點(diǎn)狀或片狀自身熒光暗區(qū)。OCT檢查，急性期可見黃斑區(qū)自視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）層垂直向上擴(kuò)散的強(qiáng)反射病灶，呈典型“豆苗”征。OCTA檢查，視網(wǎng)膜深層毛細(xì)血管叢（DCP）血流密度降低50只眼；橫斷面OCT顯示外層視網(wǎng)膜病灶暗區(qū)范圍與IR一致。初診后1個(gè)月，病情好轉(zhuǎn)18只眼（47.4%，18/38）。合并棉絨斑的5只眼中，棉絨斑消退伴視神經(jīng)纖維束缺失4只眼；視盤水腫者，視盤水腫消退。所有患眼“豆苗”征消失，病灶局限，病灶區(qū)域橢圓體帶和（或）嵌合體帶欠連續(xù)。結(jié)論 COVID-19相關(guān)AMN特征性表現(xiàn)為IR中心凹、旁中心凹楔形、類楔形或“花瓣樣”片狀暗區(qū)；OCT表現(xiàn)為黃斑區(qū)急性期自RPE層垂直向上擴(kuò)散的強(qiáng)反射病灶；OCTA表現(xiàn)為DCP血流密度降低。