目的探索利用磁性細胞分離(MACS)系統高效、快速地分離大鼠脾臟CD4+CD25+調節(jié)性T細胞。方法采用免疫磁珠兩步法分離大鼠脾臟內的CD4+CD25+調節(jié)性T細胞, 首先采用“雞尾酒”抗體和抗IgG磁珠陰性分選CD4+ T細胞，再用抗CD25PE抗體和抗PE磁珠陽性分選獲得CD4+CD25+T 細胞。分離后的細胞經流式細胞儀檢測分離純度； 臺盼藍染色檢測細胞存活率； 體外增殖實驗檢測其對CD4+CD25-T細胞的免疫抑制作用。結果陰性分選獲得的CD4+T細胞純度為（83.6±2.5）%（79%~87%）, 陽性分選后獲得的CD4+CD25+T細胞純度為（90.2±1.8）%（86%~93%）, 細胞存活率為（92.8±3.4）%（92%~95%）, 體外增殖實驗表明，CD4+CD25+T細胞能明顯抑制CD4+CD25-T 細胞的增殖（P＜0.01）。 結論采用MACS系統陰性加陽性分選可以高效、快速地獲得理想純度和有免疫抑制功能的大鼠CD4+CD25+調節(jié)性T細胞。