目的 研究CoCl2 對體外培養(yǎng)的鼠下頜骨成骨細(xì)胞的作用，觀察缺氧條件對成骨細(xì)胞VEGF 及TGF-β1 表達(dá)的影響，為臨床牽張成骨技術(shù)的分子生物學(xué)機(jī)制研究提供理論依據(jù)。 方法 取新生24 h 內(nèi)Wistar 大鼠下頜骨，改良酶消化法培養(yǎng)和純化成骨細(xì)胞，采用HE 染色、ALP 組織化學(xué)染色、Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)、鈣結(jié)節(jié)染色行細(xì)胞形態(tài)學(xué)及組織學(xué)鑒定，并繪制生長曲線。取第3 代最佳生長狀態(tài)的鼠下頜骨成骨細(xì)胞，用150 μmol/L CoCl2 處理（實(shí)驗(yàn)組），設(shè)正常狀態(tài)下培養(yǎng)為對照組，分別于培養(yǎng)后0、3、6、9、12、24 h，采用免疫熒光技術(shù)檢測VEGF 及TGF-β1 表達(dá)。 結(jié) 果 HE染色示成骨細(xì)胞形態(tài)多樣，呈三角形、多角形、圓形及鱗片形等不規(guī)則形態(tài)，突起長短不一向外伸展，胞核清晰可見；胞漿豐富，呈粉紅色，胞核藍(lán)紫色，有時可見2 個細(xì)胞核，密集處細(xì)胞形態(tài)不明顯，分界模糊，僅見大圓核細(xì)胞。ALP 組織化學(xué)染色示細(xì)胞胞質(zhì)呈黑色顆粒，細(xì)胞核輪廓不清，細(xì)胞密集區(qū)可見大量陽性細(xì)胞。Ⅰ型膠原免疫組織化學(xué)染色示實(shí)驗(yàn)組陽性細(xì)胞均勻可見，胞漿呈棕黃色，胞核周圍尤為明顯，空白對照組細(xì)胞未見棕黃色顆粒。鈣結(jié)節(jié)染色示成骨細(xì)胞于蓋玻片上培養(yǎng)15 d 后，細(xì)胞聚集成不透明區(qū)域，呈結(jié)節(jié)樣；茜素紅染色后，有橙紅色著色。培養(yǎng)各時間點(diǎn)對照組細(xì)胞激光共聚焦顯微鏡下可見較弱的VEGF 表達(dá)熒光；實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞隨缺氧時間延長，VEGF 表達(dá)熒光強(qiáng)度值增加，于術(shù)后9 h 達(dá)高峰，隨后降至正常水平。培養(yǎng)各時間點(diǎn)激光共聚焦顯微鏡下可見兩組細(xì)胞均有TGF-β1 表達(dá)熒光，對照組各時間點(diǎn)熒光強(qiáng)度值均略高于VEGF 對照組；實(shí)驗(yàn)組TGF-β1 表達(dá)在缺氧3 h 短期成倍增加，隨缺氧時間延長表達(dá)逐漸降低。 結(jié)論 經(jīng)新生大鼠下頜骨培養(yǎng)的成骨細(xì)胞性狀穩(wěn)定；適當(dāng)缺氧可誘導(dǎo)成骨細(xì)胞VEGF 和TGF-β1表達(dá)增強(qiáng)。