目的通過調(diào)節(jié)殼聚糖(chitosan,CS)與蠶絲蛋白(silk fibroin,SF)的質(zhì)量比制備不同質(zhì)量比支架材料,并檢測比較其性能。 方法通過冷凍干燥法按照SF∶CS質(zhì)量比分別為6∶4(A組)、6∶8(B組)、6∶16(C組)制備CS-SF支架。觀察各組支架材料的結(jié)構(gòu)、孔隙率、熱水溶失率、彈性模量和吸水膨脹率,掃描電鏡觀察孔徑大小及形態(tài)。采用密度梯度離心法分離4周齡SD雄性大鼠BMSCs,取第3代BMSCs接種至各組支架,MTS法檢測細胞在支架上的增殖情況。 結(jié)果傅里葉紅外光譜儀檢測示,隨著CS含量增高,代表無規(guī)卷曲/α螺旋結(jié)構(gòu)的吸收峰1 654 cm-1和1 540 cm-1不斷減小,而對應(yīng)于1 628 cm-1和1 516 cm-1相當(dāng)于β-折疊結(jié)構(gòu)的吸收峰不斷增大。A、B、C組孔隙率分別為87.36% ± 2.15%、77.82% ± 1.37%、72.22% ± 1.37%,A組顯著高于B、C組(P lt; 0.05),B組顯著高于C組(P lt; 0.05)。A、B組熱水溶失率均為0,C組為3.12% ± 1.26%。各組支架均具有良好的黏彈性,A、B、C組彈性模量在人正常膝關(guān)節(jié)軟骨的彈性模量范圍(4~15 kPa)內(nèi),組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=5.523,P=0.054)。A、B、C組吸水膨脹率分別為1 528.52% ± 194.63%、1 078.22% ± 100.52%、1 320.05% ± 179.97%,A組顯著高于B組(P=0.05),A、C組間及B、C組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。掃描電鏡觀察示,A組支架孔徑大小較均一(50~250 μm),孔隙相通性好;B、C組結(jié)構(gòu)紊亂,孔徑大小不一,孔隙相通性差。MTS檢測示,1、3、5、7 d時A組活細胞數(shù)明顯高于B、C組(P lt; 0.05);3、5、7 d時,B、C組間差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論按SF∶CS質(zhì)量比為6∶4制備的CS-SF支架適合軟骨組織工程的要求。
目的 探討雙層殼聚糖(chitosan,CS)/HAP 復(fù)合支架作為骨軟骨組織工程支架的可行性,并結(jié)合兔自體BMSCs 修復(fù)骨軟骨缺損。 方法 采用凍干法和燒結(jié)法制作雙層CS/HAP 復(fù)合支架,檢測其理化特性。取日本大耳白兔骨髓4 ~ 6 mL,全骨髓培養(yǎng)法分離純化BMSCs,并鑒定。調(diào)整第2 代BMSCs 細胞密度為2 × 107 個/mL,應(yīng)用纖維蛋白膠種植技術(shù),接種至雙層CS/ HAP 復(fù)合支架,體外構(gòu)建細胞- 支架復(fù)合物。取36 只日本大耳白兔,于右側(cè)膝關(guān)節(jié)股骨下端外側(cè)髁負重區(qū),作一直徑4 mm、深3 mm 的圓柱形缺損,制備兔膝關(guān)節(jié)骨軟骨缺損模型。根據(jù)缺損區(qū)植入物的不同,分為A、B、C 3 組(n=12)。A 組:植入細胞- 支架復(fù)合物;B 組:植入雙層CS/HAP 復(fù)合支架;C 組:不植入任何材料,作為空白對照組。術(shù)后6、12 周取材,行大體及組織學(xué)觀察,采用改良Wakitani 法評分。 結(jié)果 雙層CS/HAP 支架CS 層孔隙率為76.00% ± 5.01%,孔徑為200 ~ 400 μm,平均300 μm,孔洞相通;HAP 層孔隙率為72.00% ± 4.23%,孔徑為200 ~ 500 μm,平均350 μm,孔洞相通,結(jié)合部結(jié)合好。全骨髓法培養(yǎng)BMSCs,第7 天可見集落形成,14 d 傳代;免疫組織化學(xué)檢測示CD44(+)和CD45(—)。大體觀察和組織學(xué)檢測顯示,A 組基本修復(fù)軟骨缺損,骨缺損修復(fù)不良,有骨小梁長入;B、C 組骨、軟骨缺損修復(fù)不良,組織學(xué)檢測以纖維組織或無新生組織形成,軟骨及骨缺損均明顯存在。術(shù)后6、12 周,A 組改良Wakitani 評分分別為(5.17 ± 1.17)分和(3.20 ± 0.75)分,均優(yōu)于B、C 組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 雙層CS/ HAP 復(fù)合支架可作為骨軟骨組織工程支架,復(fù)合BMSCs 可修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨與骨缺損,重建關(guān)節(jié)解剖結(jié)構(gòu)
目的探討后內(nèi)側(cè)聯(lián)合前外側(cè)入路治療脛骨外側(cè)平臺后外側(cè)劈裂塌陷骨折的療效。 方法回顧性分析2010年8月-2013年8月收治的19例外傷致脛骨外側(cè)平臺后外側(cè)劈裂塌陷骨折患者臨床資料。男13例,女6例;年齡25~75歲,平均36.9歲。左側(cè)8例,右側(cè)11例。均為閉合性骨折。骨折根據(jù)CT三柱分型標(biāo)準(zhǔn)均為波及后側(cè)柱的劈裂塌陷骨折,按Schatzker分型標(biāo)準(zhǔn)均為Ⅱ型,按國際內(nèi)固定研究協(xié)會/美國骨創(chuàng)傷協(xié)會(AO/OTA)分型標(biāo)準(zhǔn)均為41-B3.1.2型。受傷至手術(shù)時間7~14 d,平均9 d。采用后內(nèi)側(cè)入路直視下復(fù)位骨折并植入同種異體人工骨,橈骨遠端T形鋼板行支撐內(nèi)固定;前外側(cè)入路下取微創(chuàng)內(nèi)固定系統(tǒng)(less invasive stabilizationsystem,LISS)鋼板固定劈裂骨折。 結(jié)果手術(shù)時間50~105 min,平均69.0 min。術(shù)后切口均Ⅰ期愈合,無血管、神經(jīng)損傷及感染等早期并發(fā)癥發(fā)生?;颊呔@隨訪,隨訪時間14~20個月,平均18.2個月。X線片及CT掃描復(fù)查均顯示脛骨平臺高度和關(guān)節(jié)面恢復(fù)良好;骨折均達骨性愈合,愈合時間10~16周,平均12周;無骨折再塌陷及膝內(nèi)、外翻畸形發(fā)生。末次隨訪時,根據(jù)Rasmussen膝關(guān)節(jié)功能評分標(biāo)準(zhǔn)評定療效,獲優(yōu)12例,良5例,可2例,優(yōu)良率89.5%。 結(jié)論對于脛骨外側(cè)平臺后外側(cè)劈裂塌陷骨折,經(jīng)后內(nèi)側(cè)入路能較好顯露脛骨后外側(cè)、后內(nèi)側(cè)平臺,允許直視下復(fù)位骨折并植骨內(nèi)固定,經(jīng)前外側(cè)入路植入LISS鋼板,手術(shù)創(chuàng)傷小、手術(shù)時間短且并發(fā)癥少。
目的總結(jié)指動脈背側(cè)穿支蒂螺旋槳皮瓣修復(fù)指端軟組織缺損的療效。 方法2014年1月-2015年6月,采用指動脈背側(cè)穿支蒂螺旋槳皮瓣修復(fù)16例指端皮膚軟組織缺損患者。男12例,女4例;年齡18~58歲,平均37歲。致傷原因:重物壓傷5例,機器絞傷4例,切割傷7例。拇指2例,示指4例,中指3例,環(huán)指6例,小指1例。受傷至入院時間1~4 h,平均2 h。創(chuàng)面范圍1.2 cm×0.9 cm~2.5 cm×2.0 cm,皮瓣切取范圍1.3 cm×1.0 cm~3.0 cm×2.2 cm。供區(qū)游離植皮修復(fù)。 結(jié)果術(shù)后除1例皮瓣部分壞死外,其余皮瓣及植皮均成活,創(chuàng)面Ⅰ期愈合。16例均獲隨訪,隨訪時間6~12個月,平均10個月。皮瓣質(zhì)地柔軟,外觀滿意,術(shù)后6個月兩點辨別覺達5~8 mm,平均6 mm。末次隨訪時,根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會手外科學(xué)會上肢部分功能評定試用標(biāo)準(zhǔn)評定,獲優(yōu)10例,良4例,可2例,優(yōu)良率87.5%。 結(jié)論指動脈背側(cè)穿支蒂螺旋槳皮瓣供區(qū)選擇更自由,皮瓣切取范圍小,感覺恢復(fù)好,供受區(qū)外觀滿意。