目的探討早期生長反應(yīng)基因-1(Egr-1)DNA酶(Egr-1 DNA enzyme，EDRz)對血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖和內(nèi)膜增生的抑制作用，從而證實(shí)基因治療靜脈移植后狹窄、閉塞的可行性。方法構(gòu)建EDRz，建立自體靜脈移植模型，將大鼠右頸總靜脈端-端吻合于腎下腹主動脈，EDRz轉(zhuǎn)染移植靜脈，分別于移植后1、2、6、24 h及3、7、14、28、42 d切取移植靜脈標(biāo)本，每個時相按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)抽取10只大鼠。熒光顯微鏡下觀察EDRz轉(zhuǎn)染移植靜脈情況; 應(yīng)用原位雜交和RT-PCR方法檢測Egr-1 mRNA的表達(dá); 應(yīng)用Western蛋白印跡和免疫組織化學(xué)方法檢測Egr-1蛋白表達(dá)情況; HE染色光鏡下觀察組織學(xué)形態(tài)。結(jié)果①EDRz轉(zhuǎn)染移植靜脈情況: 移植后1 h時，EDRz主要位于移植靜脈的外膜、中膜和部分內(nèi)皮細(xì)胞; 2、6及24 h時，EDRz則主要位于移植靜脈的中膜; 7 d時，EDRz主要位于移植靜脈的內(nèi)膜; 14、28及42 d時未檢測到EDRz的表達(dá)。②Egr-1 mRNA表達(dá)結(jié)果。RT-PCR檢測結(jié)果: 轉(zhuǎn)染EDRz后1 h時，Egr-1 mRNA表達(dá)出現(xiàn)高峰，2、6及24 h表達(dá)下降，3 d時表達(dá)微弱，移植后7、14、28及42 d未見Egr-1 mRNA的表達(dá)，轉(zhuǎn)染EDRz后1 h時Egr-1 mRNA表達(dá)明顯高于其余各時相(Plt;0.01)。原位雜交檢測Egr-1 mRNA表達(dá)的變化趨勢與RT-PCR結(jié)果基本一致。③Egr-1蛋白表達(dá)結(jié)果。Western蛋白印跡結(jié)果: 正常靜脈中未檢測到Egr-1蛋白陽性表達(dá)。轉(zhuǎn)染EDRz后2 h時，出現(xiàn)Egr-1蛋白陽性表達(dá)，6 h、24 h及3 d時其表達(dá)逐漸降低，移植后1 h時和移植后7、14、28及42 d時未見Egr-1蛋白陽性表達(dá)。移植后2 h時的Egr-1蛋白表達(dá)的吸光度值高于其他時相(Plt;0.01)。免疫組織化學(xué)方法檢測的Egr-1蛋白陽性表達(dá)的變化趨勢與Western蛋白印跡結(jié)果基本一致。④EDRz轉(zhuǎn)染移植靜脈與未轉(zhuǎn)染同期相比VSMC的增殖程度和內(nèi)膜厚度明顯減輕。結(jié)論EDRz通過減少Egr-1在自體移植靜脈中的表達(dá)，可有效地抑制自體移植靜脈中VSMC增殖和內(nèi)膜增生，可用來防治自體靜脈移植后所導(dǎo)致的血管狹窄、閉塞。