脫細(xì)胞組織工程支架具有與原生組織相似的結(jié)構(gòu)體系和機(jī)械性能，具有良好的生物相容性、有利于細(xì)胞的粘附生長、誘導(dǎo)血管再生，且無免疫原性。而京尼平（Genipin）具有抗炎、抗血栓、抗氧化性，抑制血管及內(nèi)皮細(xì)胞炎性活化，并能有效提高生物支架機(jī)械性能、抑制炎癥并減小降解率。通過京尼平交聯(lián)脫細(xì)胞基質(zhì)能進(jìn)一步改善組織工程基質(zhì)的相關(guān)性能，有助于促進(jìn)組織工程更好地應(yīng)用于胸心外科臨床實(shí)踐。現(xiàn)對京尼平在胸心外科組織工程領(lǐng)域中的研究現(xiàn)狀、展望和可能的前景進(jìn)行綜述。
目的探討新型多孔活性骨水泥（porous bioactive bone cement，PBC）在體內(nèi)的生物力學(xué)特性，觀察材料降解及新骨形成情況。 方法將聚甲基丙烯酸甲酯（polymethylmethacrylate，PMMA）粉末、生物玻璃粉末和殼聚糖顆粒按照不同質(zhì)量百分比（W/W，%）比例配制成3種PBC：PBCⅠ（50︰40︰10）、PBCⅡ（40︰50︰10）和PBCⅢ（30︰60︰10）。32只10月齡新西蘭大白兔，雌雄不限，體重4.0～4.5 kg；制備直徑4 mm、深10 mm的雙側(cè)股骨髁部缺損模型。動物模型隨機(jī)分為4組（n=8），分別于雙側(cè)缺損處植入單純PMMA骨水泥（A組）、PBCⅠ（B組）、PBCⅡ（C組）和PBC Ⅲ（D組）。術(shù)后觀察實(shí)驗動物一般情況，1周時行膝關(guān)節(jié)正側(cè)位X線片檢查，3、6個月取標(biāo)本行生物力學(xué)測試和Van-Gieson染色組織學(xué)觀察；取未植入的對應(yīng)骨水泥行生物力學(xué)測試，作為對照。 結(jié)果實(shí)驗動物均存活至實(shí)驗完成。1周X線片檢查示各組植入骨水泥位置良好。生物力學(xué)測試示，植入前及術(shù)后3、6個月，C、D組壓縮強(qiáng)度和彈性模量均較A組明顯下降（P lt; 0.05）；B組壓縮強(qiáng)度及3、6個月彈性模量較A組明顯下降（P lt; 0.05）；C、D組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。植入前及術(shù)后3個月，C、D組兩指標(biāo)均較B組明顯下降（P lt; 0.05）；6個月，C組壓縮強(qiáng)度和D組彈性模量較B組明顯下降（P lt; 0.05）。與植入前相比，B、C、D組術(shù)后3、6個月兩指標(biāo)均顯著下降（P lt; 0.05），A組無顯著變化（P gt; 0.05）。組織學(xué)觀察示，術(shù)后3個月，A組纖維結(jié)締組織環(huán)繞在PMMA和骨組織之間；B、C、D組殼聚糖顆粒有不同程度降解，其中D組降解最明顯；6個月，A組較前無明顯變化；B、C、D組可見骨組織沿殼聚糖降解后形成的空隙向骨水泥內(nèi)部生長，C、D組骨生長優(yōu)于B組。定量分析顯示，A、B、C、D組骨組織含量百分比呈逐漸上升趨勢，且各組內(nèi)術(shù)后6個月顯著高于3個月。 結(jié)論以PMMA粉末、生物玻璃粉末和殼聚糖顆粒按照質(zhì)量百分比（W/W，%）40︰50︰10及30︰60︰10比例制備的PBC較單純PMMA骨水泥具有更好的生物相容性及生物力學(xué)特性。
目的 改進(jìn)雪旺細(xì)胞（Schwann cells，SCs）原代培養(yǎng)方法，以獲得大量高純度SCs；研究豬小腸黏膜下層（small intestinal submucosa，SIS）與SCs的生物相容性；通過復(fù)合SCs，使SIS負(fù)載NGF。 方法取2～3日齡SD乳鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng)，以胰蛋白酶、Ⅱ型膠原酶分步消化，差速貼壁20 min，G418處理48 h，含2.5%FBS的H-DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)；MTT法檢測SCs增殖情況，抗S-100免疫熒光染色檢測SCs純度。將第3代SCs和SIS復(fù)合培養(yǎng)，行HE染色和掃描電鏡觀察兩者復(fù)合生長情況，復(fù)合培養(yǎng)1、2、3、4、5、7 d ELISA法檢測培養(yǎng)上清中NGF含量。復(fù)合培養(yǎng)3、5、7、10、13、15 d后反復(fù)凍融脫細(xì)胞處理，ELISA法檢測脫細(xì)胞后SIS中NGF含量。 結(jié)果純化后的SCs純度達(dá)98%以上；MTT檢測示SCs傳代后3 d進(jìn)入對數(shù)生長期，7 d后進(jìn)入平臺期。HE染色和掃描電鏡觀察均顯示SCs在SIS上黏附良好，細(xì)胞形態(tài)呈紡錘形，有明顯突起，分泌較多細(xì)胞外基質(zhì)。ELISA檢測發(fā)現(xiàn)SCs與SIS復(fù)合培養(yǎng)后，培養(yǎng)上清中的NGF含量隨時間延長而逐漸升高，與同時間點(diǎn)對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。通過與SCs復(fù)合后反復(fù)凍融脫細(xì)胞，SIS中NGF含量在培養(yǎng)10 d達(dá)峰值（414.29 ± 20.87）pg/cm2，顯著高于未復(fù)合細(xì)胞的單純SIS材料中NGF含量（4.92 ± 2.06） pg/ cm2，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論聯(lián)合雙酶消化、差速貼壁、G418處理、低濃度酶消化和低濃度血清培養(yǎng)，可在較短時間內(nèi)獲得大量高純度SCs。SCs與SIS復(fù)合生長相容性好，不影響SCs的NGF分泌。通過與SCs的復(fù)合、反復(fù)凍融脫細(xì)胞后，SIS中負(fù)載了大量NGF，有望成為良好的神經(jīng)修復(fù)材料。
目的研究表面含硅微弧氧化（micro-arc oxidation，MAO）涂層鎂合金ZK60體外與成骨細(xì)胞的生物相容性。 方法掃描電鏡觀察表面含硅MAO涂層鎂合金ZK60的表面形貌，并用能譜分析儀檢測涂層元素組成。實(shí)驗分為表面含硅MAO涂層鎂合金ZK60組（A組）、無涂層鎂合金ZK60組（B組）、醫(yī)用鈦合金組（C組）及空白對照組（D組）。取A、B、C組對應(yīng)材料按照ISO 10993-12標(biāo)準(zhǔn)（試樣表面積/浸體介質(zhì)= 1.25 cm2/mL）分別制備材料浸提液并培養(yǎng)小鼠前成骨細(xì)胞MC3T3-El，D組采用含10%FBS的α-MEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，MTT法檢測細(xì)胞增殖活力，并檢測成骨細(xì)胞ALP表達(dá)活性。掃描電鏡觀察A、B、C組材料表面細(xì)胞黏附形態(tài)，檢測涂層表面的蛋白吸附能力，采用DAPI觀察細(xì)胞早期黏附情況，鈣黃綠素/乙錠均二聚物1（calcein-AM/ethidium homodimer 1，calcein- AM/ EthD- 1）雙重染色觀察細(xì)胞生長狀態(tài)。 結(jié)果掃描電鏡下見表面含硅MAO涂層鎂合金ZK60呈粗糙、多孔表面形態(tài)，涂層的主要組成元素為Mg、O和Si。材料浸提液培養(yǎng)后各組細(xì)胞輪廓清晰、形態(tài)良好，其中A組細(xì)胞伸展性更好。培養(yǎng)5 d時，MTT檢測示A組細(xì)胞增殖活力明顯高于其他組（P lt; 0.05）。掃描電鏡觀察見A、C組材料表面細(xì)胞伸展性良好，優(yōu)于B組，且A組細(xì)胞與材料表面黏附更緊密。A組材料表面蛋白吸附量為（152.7 ± 6.3）μg/mL，明顯高于B、C組的（96.3 ± 3.9）、（96.1 ± 8.7） μg/ mL（P lt; 0.05）；各時間點(diǎn)A組細(xì)胞黏附數(shù)量均明顯高于B、C組（P lt; 0.05）。calcein-AM/EthD-1雙染觀察見A、C組材料表面細(xì)胞生長狀態(tài)優(yōu)于B組。 A、B組ALP表達(dá)分別為15.55 ± 0.29和13.75 ± 0.44，明顯高于C、D組的10.43 ± 0.79和10.73 ± 0.47（P lt; 0.05），且A組高于B組（P lt; 0.05）。 結(jié)論表面含硅MAO涂層鎂合金ZK60可促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖、黏附及分化，具有良好生物相容性，是一種較理想的鎂合金表面改性方法。
目的對軟骨組織工程支架材料的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，并對其發(fā)展前景進(jìn)行展望。 方法廣泛查閱近年來關(guān)節(jié)軟骨組織工程支架的相關(guān)文獻(xiàn)，并對多種天然生物支架材料和人工合成支架材料的相關(guān)實(shí)驗及臨床應(yīng)用效果進(jìn)行分析總結(jié)。 結(jié)果軟骨組織工程支架的設(shè)計對軟骨組織損傷修復(fù)成功與否至關(guān)重要，理想的軟骨支架可以引導(dǎo)并促進(jìn)新生軟骨組織的形成。目前所應(yīng)用的支架材料均有其局限性。 結(jié)論進(jìn)一步深入研究軟骨組織工程支架，對未來臨床軟骨損傷的修復(fù)具有重要意義。
目的制備膠原-殼聚糖/膠原-納米羥基磷灰石（collagen-chitosan/nano-hydroxyapatite-collagen-polylactic acid，Col-CS/nHAC-PLA）仿生支架材料，檢測生物相容性，為其在骨軟骨缺損修復(fù)中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方 法以1，4二氧六環(huán)為溶劑，按8%質(zhì)量濃度加入PLA和等量nHAC溶解，制備nHAC-PLA；用2%醋酸溶液配制濃度為2%的CS純?nèi)芤杭?%的Col純?nèi)芤海再|(zhì)量比（M/M）20∶1混合，倒入含nHAC-PLA的模具中，冷凍干燥成形制備Col-CS/nHAC-PLA仿生支架。行急性全身毒性實(shí)驗、皮內(nèi)刺激實(shí)驗、熱源實(shí)驗、溶血實(shí)驗、體外細(xì)胞毒實(shí)驗、骨植入實(shí)驗，評價其生物相容性。 結(jié)果Col-CS/nHAC-PLA仿生支架無急性全身毒性；皮內(nèi)刺激實(shí)驗示原發(fā)刺激指數(shù)為0分，為極輕微刺激；熱原實(shí)驗示3只實(shí)驗動物體溫升高均lt; 0.6℃，體溫升高總和lt; 1.3℃，符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)；溶血實(shí)驗示平均溶血率為1.38%，符合 ≤5%標(biāo)準(zhǔn)。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗示材料浸提液不影響兔BMSCs增殖，毒性分級為Ⅰ級。骨植入實(shí)驗顯示支架材料與周邊組織相容性好。 結(jié)論Col-CS/nHAC-PLA仿生支架材料具有良好生物相容性，有望成為較理想的組織工程骨軟骨支架。
目的探討聚氨酯、硅膠、聚氯乙烯3種中心靜脈導(dǎo)管醫(yī)用生物材料對XWLC-05（Xuanwei Lung Cancer-05）細(xì)胞增殖、凋亡及細(xì)胞周期的影響，為臨床選擇中心靜脈導(dǎo)管提供依據(jù)。 方法取XWLC-05細(xì)胞系復(fù)蘇、培養(yǎng)并傳代，取第3代細(xì)胞分別與大小為1.0 cm × 1.0 cm的聚氨酯、硅膠、聚氯乙烯培養(yǎng)，以不加材料培養(yǎng)作為對照。培養(yǎng)72 h時倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況；培養(yǎng)24、48、72 h，MTT法檢測細(xì)胞增殖，采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期及凋亡率。 結(jié)果倒置顯微鏡下觀察示，培養(yǎng)72 h對照組細(xì)胞生長良好，聚氨酯組與硅膠組細(xì)胞生長情況與對照組相似；聚氯乙烯組細(xì)胞數(shù)量減少，壞死、溶解，殘留貼壁細(xì)胞形態(tài)畸形，透光度降低。MTT法檢測3種材料與細(xì)胞共培養(yǎng)24、48 h，細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及凋亡率與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。72 h時與對照組比較，各實(shí)驗組材料均顯著抑制細(xì)胞增殖（P lt; 0.05），其中聚氯乙烯組較硅膠組及聚氨酯組明顯（P lt; 0.05），硅膠組及聚氨酯組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）；各實(shí)驗組材料均顯著影響細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期，其中聚氯乙烯組顯著，硅膠組次之，聚氨酯組最小，組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論聚氯乙烯顯著影響XWLC-05細(xì)胞的增殖、凋亡及細(xì)胞周期；與聚氯乙烯、硅膠相比，聚氨酯材料具有較好生物相容性。
目的 總結(jié)應(yīng)用人工補(bǔ)片胸壁重建治療胸壁巨大缺損的療效。 方法 2002 年1 月－ 2008 年10 月，收治14 例胸壁腫瘤患者。男10 例，女4 例；年齡28 ～ 67 歲，平均45 歲。原發(fā)性腫瘤11 例，轉(zhuǎn)移性腫瘤3 例。腫瘤位于前胸壁5 例，后胸壁3 例，側(cè)胸壁6 例。病程20 ～ 270 d?；颊呔袛U(kuò)大根治切除術(shù)，切除2 ～ 5 根肋骨，胸壁缺損范圍9 cm × 7 cm ～ 17 cm × 12 cm，采用單層或雙層Marlex 網(wǎng)片結(jié)合自體肌肉瓣覆蓋重建胸壁。 結(jié)果 患者均順利完成手術(shù)。術(shù)后切口均Ⅰ期愈合。胸壁無明顯反常呼吸。14 例均獲隨訪，隨訪時間13 ～ 26 個月，平均21 個月。隨訪期間未出現(xiàn)與材料有關(guān)的宿主反應(yīng)。患者胸壁無明顯畸形，外觀良好，呼吸運(yùn)動時胸壁重建處無不適。1 例因腫瘤復(fù)發(fā)伴肝臟轉(zhuǎn)移死亡。 結(jié)論 人工補(bǔ)片胸壁重建治療胸壁巨大缺損安全、有效。
目的 對鎳鈦（NiTi）記憶合金植入物進(jìn)行表面修飾是屏蔽Ni 離子釋放的有效方法，鈦鈮（TiNb）合金作為涂層材料不會影響NiTi 的超彈性和記憶效應(yīng)。對TiNb 涂層的NiTi 記憶合金植入體植入骨組織后的骨組織生物相容性進(jìn)行評價，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗依據(jù)。 方法 對直徑4 mm、長12 mm 的NiTi 記憶合金圓柱體采用磁控濺射技術(shù)分別進(jìn)行Ti 涂層和TiNb 涂層，另一組僅表面拋光清洗不進(jìn)行涂層。取成年雜種犬15 只，體重（15 ± 2）kg，隨機(jī)分為3 組，每組5 只，分別為NiTi 組、Ti 涂層組和TiNb 涂層組。制備犬雙側(cè)股骨干假體植入模型，垂直股骨外側(cè)皮質(zhì)分別植入NiTi 無涂層、Ti 涂層和TiNb 涂層記憶合金圓柱體，每只犬植入10 枚，間距1.0 ～ 1.5 cm。術(shù)后12 個月處死動物取材，X 線片觀察植入體植入方向，未與股骨皮質(zhì)垂直的植入體標(biāo)本作為無效標(biāo)本放棄，其余有效標(biāo)本一部分（NiTi 組、Ti 涂層組和TiNb 涂層組標(biāo)本數(shù)分別為12、10 和14 枚）進(jìn)行生物力學(xué)推出實(shí)驗，計算最大剪切強(qiáng)度；另一部分（NiTi 組、Ti 涂層組和TiNb 涂層組標(biāo)本數(shù)分別為8、5 和10 枚）行不脫鈣切片用于組織學(xué)觀察和計算骨性結(jié)合率。 結(jié)果 Ti 涂層組和TiNb 涂層組的剪切強(qiáng)度分別為（95.10 ± 10.03）、（91.20 ± 15.42）MPa，明顯高于NiTi 組的（71.60 ± 14.24）MPa（P lt; 0.01）； 2 個涂層組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。Giemsa 染色示3 組植入體周圍均未見明顯巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤，偶爾可見少量淋巴細(xì)胞。NiTi 組、Ti 涂層組和TiNb 涂層組的骨性結(jié)合率分別為21.30% ± 0.23%、32.50% ± 0.31%和38.60% ± 0.58%，3 組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.01）。 結(jié)論 各植入體和骨組織均具有良好的生物相容性；Ti 涂層和TiNb 涂層的骨生物相容性相近，但從骨性結(jié)合率結(jié)果分析，TiNb 涂層的骨組織生物相容性更佳。
目的 研究脫細(xì)胞血管基質(zhì)快速高效的制備方法并對其進(jìn)行生物相容性評價，為組織工程血管的研究尋找合適的支架材料。 方法 取20 根長50 mm 新鮮山羊頸動脈經(jīng)—80℃冷凍、37℃水浴復(fù)溫，反復(fù)凍融3 次，在506 MPa、4℃條件下超高壓處理20 min，0.125%SDS 中37℃振搖（100 r/min）12 h，徹底去除細(xì)胞后，行HE 染色、Masson染色、掃描電鏡觀察及生物力學(xué)測定研究其組織結(jié)構(gòu)的變化；Hoechst33258 熒光染色和細(xì)胞DNA 殘留量分析評價脫細(xì)胞效果；通過接觸細(xì)胞毒性實(shí)驗、MTT 活性測試及皮下埋植實(shí)驗對制備的脫細(xì)胞血管基質(zhì)進(jìn)行生物相容性分析。皮下埋植實(shí)驗取清潔級SD 大鼠10 只，體重200 ～ 230 g，分為2 組（n=5），實(shí)驗組于大鼠背部皮下埋植結(jié)合物理化學(xué)方法處理的脫細(xì)胞血管基質(zhì)，對照組埋植單純物理方法處理的脫細(xì)胞血管基質(zhì)，分別于術(shù)后1、2、3、4、8 周取出行HE 染色觀察。 結(jié) 果 HE 染色及Masson 染色顯示脫細(xì)胞血管基質(zhì)無細(xì)胞成分殘留，保持較完整的膠原成分；掃描電鏡觀察血管表面以膠原為主，適合細(xì)胞黏附；Hoechst33258 熒光染色脫細(xì)胞血管基質(zhì)材料未見明顯陽性核染色；苯酚- 氯仿提取脫細(xì)胞血管基質(zhì)殘留DNA 含量，電泳檢測分析顯示其中DNA 含量較正常血管顯著降低；生物力學(xué)檢測示脫細(xì)胞血管基質(zhì)最大荷載時的應(yīng)力及應(yīng)變與正常血管比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，保持了正常血管的力學(xué)特征；接觸細(xì)胞毒性實(shí)驗與MTT 法測定示脫細(xì)胞血管基質(zhì)與細(xì)胞有良好的黏附性，細(xì)胞毒性為0 ～ 1 級；實(shí)驗組皮下埋植術(shù)后8 周材料周圍基本未見炎性細(xì)胞，對照組仍有明顯淋巴細(xì)胞浸潤。 結(jié)論 經(jīng)反復(fù)凍融、超高壓及小劑量SDS 處理的脫細(xì)胞血管基質(zhì)是一種構(gòu)建組織工程血管的理想支架材料。