目的 探討應(yīng)用幾丁糖/ 聚乙烯醇神經(jīng)導(dǎo)管修復(fù)獼猴周?chē)窠?jīng)缺損的效果。 方法 成年獼猴12 只，雄性5 只，雌性7 只，體重3.26 ～ 5.35 kg。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成A、B、C 3 組，制備左側(cè)橈神經(jīng)2 cm 缺損模型，分別用幾丁糖/ 聚乙烯醇神經(jīng)導(dǎo)管移植、神經(jīng)切除曠置和自體神經(jīng)逆行原位移植處理。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物右側(cè)為正常對(duì)照。術(shù)后8 個(gè)月，行大體觀察、組織學(xué)觀測(cè)及電生理檢測(cè)評(píng)價(jià)神經(jīng)再生效果。 結(jié)果 術(shù)后8 個(gè)月，A 組再生神經(jīng)通過(guò)神經(jīng)導(dǎo)管長(zhǎng)入神經(jīng)缺損的遠(yuǎn)側(cè)端，再生神經(jīng)粘連較輕；B 組未見(jiàn)再生神經(jīng)通過(guò)神經(jīng)缺損斷端；C 組移植神經(jīng)與周?chē)M織粘連較重。A、C 組可檢測(cè)出肌電圖表現(xiàn)，B 組未檢測(cè)到。A、C 組間波幅差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），但均不及正常對(duì)照側(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；C 組潛伏期和神經(jīng)傳導(dǎo)速度優(yōu)于A 組，但均不及正常對(duì)照側(cè)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。有髓神經(jīng)纖維密度：A、C 組較正常對(duì)照側(cè)小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；A、C 組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。有髓神經(jīng)纖維直徑和髓鞘厚度：C 組優(yōu)于A 組，但均不及正常對(duì)照側(cè)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt; 0.05）。 結(jié)論 幾丁糖/ 聚乙烯醇神經(jīng)導(dǎo)管具有促進(jìn)獼猴神經(jīng)軸突再生的作用，有望成為自體神經(jīng)替代材料應(yīng)用于周?chē)窠?jīng)缺損修復(fù)。
目的 檢測(cè)聚乙烯醇（polyvinyl alcohol，PVA）/ 柞蠶絲素蛋白（wild antheraea pernyi silk fibroin，WSF）電紡膜與肌腱細(xì)胞的細(xì)胞相容性，探討其作為肌腱組織工程支架材料的可行性。 方法 以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98% 的甲酸為溶劑，配制濃度均為11% 的WSF 溶液、PVA 溶液及PVA/WSF（質(zhì)量配比為9 ∶ 1）溶液，采用電紡絲技術(shù)制備WSF、PVA及PVA/WSF 電紡膜，掃描電鏡觀察電紡成絲情況。取5 只3 日齡SD 大鼠尾腱，體外分離培養(yǎng)肌腱細(xì)胞并傳至第3 代進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取濃度為1 × 106 個(gè)/ mL 肌腱細(xì)胞分別與PVA 及PVA/WSF 電紡膜復(fù)合培養(yǎng)，4、12 h 采用MTT 法測(cè)量細(xì)胞黏附率。取濃度為4.5 × 103 個(gè)/mL 肌腱細(xì)胞，分別于PVA、1/2 PVA、1/4 PVA、PVA/WSF、1/2 PVA/WSF、1/4 PVA/WSF 電紡膜浸提液中培養(yǎng)，MTT 法測(cè)定培養(yǎng)1、3、5、7 d 的吸光度（A）值，并進(jìn)行毒性等級(jí)評(píng)價(jià)。取PVA、PVA/WSF 電紡膜分別與細(xì)胞密度為1 × 106 個(gè)/ mL 的肌腱細(xì)胞懸液100 μL 復(fù)合培養(yǎng)制備細(xì)胞- 材料復(fù)合物，7 d 后行HE 染色觀察，1、3、5、7 d行掃描電鏡觀察。 結(jié)果 WSF 甲酸溶液無(wú)法電紡成絲，PVA 和PVA/WSF 甲醛溶液均可成功電紡成絲。肌腱細(xì)胞與PVA、PVA/WSF 電紡膜復(fù)合培養(yǎng)4 h 后，其細(xì)胞黏附率分別為26.9% ± 0.4%、87.0% ± 1.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=100.400，P=0.000）；復(fù)合培養(yǎng)12 h 后，其細(xì)胞黏附率分別為35.2% ± 0.6%、110.0% ± 1.7%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=42.500，P=0.000）。體外浸提液毒性評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，培養(yǎng)后1、3、5、7 d 各種電紡膜間細(xì)胞A 值比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；1/2 PVA和1/4 PVA 浸提液細(xì)胞毒性等級(jí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。細(xì)胞- 材料復(fù)合物的組織學(xué)及掃描電鏡觀察顯示肌腱細(xì)胞均可黏附于PVA、PVA/WSF 電紡膜表面，但PVA/WSF 電紡膜上細(xì)胞較多。 結(jié) 論 PVA/WSF 電紡膜支架材料具有良好的細(xì)胞相容性，有望成為肌腱組織工程的理想支架。
通過(guò)體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞與支架材料復(fù)合培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的研究，評(píng)價(jià)精氨酸- 甘氨酸- 天冬氨酸- 重組蛛絲蛋白（pNSR16）/ 聚乙烯醇（poly vinyl alcohol，PVA）支架材料的細(xì)胞相容性。 方法 通過(guò)溶劑澆鑄 / 粒子瀝濾的方法制備pNSR16/PVA 支架材料及其浸提液。將小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（NIH-3T3 細(xì)胞）與浸提液培養(yǎng)，采用MTT法檢測(cè)培養(yǎng)1、3、5 d 時(shí)支架材料的細(xì)胞毒性。將NIH-3T3 細(xì)胞與pNSR16/PVA 支架材料復(fù)合培養(yǎng)2、4、6 d 后行掃描電鏡、HE 染色觀察，并于復(fù)合培養(yǎng)6 d 后行免疫組織化學(xué)檢測(cè)，觀察NIH-3T3 細(xì)胞在支架材料上的黏附、生長(zhǎng)及表達(dá)功能情況。 結(jié)果 MTT 法檢測(cè)顯示pNSR16/PVA 支架材料的細(xì)胞毒性為0 級(jí)。掃描電鏡觀察細(xì)胞在支架材料復(fù)合培養(yǎng)4 d后即可覆蓋支架材料表面，細(xì)胞呈一定方向排列。HE 染色示細(xì)胞能在支架表面黏附和生長(zhǎng)，且隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞向支架內(nèi)部遷移。免疫組織化學(xué)檢測(cè)到NIH-3T3 細(xì)胞分泌的bFGF，細(xì)胞能進(jìn)行正常分化。 結(jié)論 pNSR16/PVA 支架材料具有良好的細(xì)胞相容性，有望作為一種較理想的組織工程支架材料。
目的 制備并評(píng)價(jià)羧甲基殼聚糖-HA- 聚乙烯醇[carboxymethyl-chitosan/HA/ poly（vinyl alcohol），CHP] 共混膜片的理化性質(zhì)、眼內(nèi)生物相容性，探討其用于青光眼濾過(guò)手術(shù)的可行性。 方法 取羧甲基殼聚糖、HA、聚乙烯醇按 5 ∶ 4 ∶ 1（M/M）共混交聯(lián)，用流延法制備CHP 共混膜片。測(cè)定膜片吸水率、溶脹比、通透性及力學(xué)性能。取新西蘭白兔結(jié)膜下組織，分離培養(yǎng)兔眼結(jié)膜下成纖維細(xì)胞，取第4 代細(xì)胞以5 × 103 個(gè)/mL 密度接種于貼附CHP 共混膜片（實(shí)驗(yàn)組）及不加膜片（對(duì)照組）的細(xì)胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)，于培養(yǎng)24、48、72 h 取細(xì)胞行MTT 檢測(cè)。將6 只新西蘭白兔隨機(jī)分為2 組（n=3），將CHP 共混膜片及SK 膠分別植入兔眼前房及結(jié)膜下，作為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組。術(shù)后第1、3、5、9、11、20、30、45、60 天進(jìn)行裂隙燈觀察，記錄雙眼反應(yīng)，第15 天實(shí)驗(yàn)組取角膜組織行掃描電鏡觀察，以研究共混膜片生物相容性和降解性。 結(jié)果 CHP 共混膜片吸水率為83.8% ± 1.3%，溶脹比為3.59 ± 0.50，干、濕態(tài)時(shí)抗張強(qiáng)度分別為（20.59 ± 1.73）、（0.51 ± 0.13）MPa，斷裂伸長(zhǎng)率分別為10.69% ± 1.16%、53.15% ± 2.46%。CHP 共混膜片對(duì) NaCl、L- 酪氨酸均有良好的通透性。接種后24、48、72 h 實(shí)驗(yàn)組吸光度（A）值分別為 0.207 ± 0.083、0.174 ± 0.080、0.181 ± 0.048，對(duì)照組分別為0.284 ± 0.011、0.272 ± 0.083、0.307 ± 0.056，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。術(shù)后第1 天實(shí)驗(yàn)組前房植入共混膜片周?chē)猩倭啃鯛钗餄B出；第3 天滲出物吸收；第11 天無(wú)明顯炎性反應(yīng)；第60 天植入共混膜已大部分降解。術(shù)后15 d，掃描電鏡觀察示角膜內(nèi)皮細(xì)胞六邊形形態(tài)完整，表面無(wú)降解顆粒附著。對(duì)照組因SK 膠質(zhì)地軟，易斷裂，未能成功植入至前房。術(shù)后第1 天實(shí)驗(yàn)組結(jié)膜植入處結(jié)膜局部有輕度充血，第9 天恢復(fù)正常，至第60 天無(wú)角膜水腫、前房炎性反應(yīng)。對(duì)照組觀察結(jié)果與實(shí)驗(yàn)組相似。 結(jié)論 CHP 共混膜片具有較好的理化性質(zhì)及眼內(nèi)生物相容性，在青光眼濾過(guò)手術(shù)中具有潛在應(yīng)用價(jià) 值。
【摘 要】 目的 研制一種可生物降解的膠原- 殼聚糖- 聚乙烯醇[poly（vinyl alcohol），PVA] 復(fù)合人工淚小管，用于治療因淚道阻塞導(dǎo)致的溢淚癥。 方法 按照一定比例均勻混合膠原、殼聚糖、醫(yī)用PVA 溶液，通過(guò)反復(fù)的凍融過(guò)程使其形成彈性凝膠，再依次經(jīng)過(guò)清洗、造孔、脫水、剪切后即得T1、T2 和T3 組的可降解人工淚小管。光鏡下觀察表面形貌和測(cè)量?jī)?nèi)、外直徑。掃描電鏡觀察T2 組人工淚小管凝膠態(tài)和干態(tài)的斷口形貌，以及是否存在相分離現(xiàn)象。通過(guò)吸水溶脹性能測(cè)試計(jì)算3 組人工淚小管的吸水率和膨脹率。采用體外降解實(shí)驗(yàn)初步觀察3 組人工淚小管的降解情況。 結(jié) 果 通過(guò)物理交聯(lián)成膠的方法成功制備出內(nèi)徑0.5 ～ 0.7 mm，外徑0.9 ～ 1.5 mm，長(zhǎng)度≥ 20 mm 的膠原- 殼聚糖-PVA 復(fù)合人工淚小管。掃描電鏡觀察到液氮脆斷的人工淚小管內(nèi)部成分分布均勻，內(nèi)外壁表面平整，冷凍干燥的人工淚小管斷口呈凝膠態(tài)的互穿網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。3 組不同成分的人工淚小管在PBS 溶液中浸泡30 min 后均快速吸水溶脹，外徑擴(kuò)大100% ～ 120%，內(nèi)徑擴(kuò)大20% ～ 30%，并且隨膠原含量增高，溶脹速度增快，平衡溶脹率增大。3 組人工淚小管在37℃含2 mg/mL 溶菌酶的PBS 液中浸泡1 個(gè)月后，表面有部分細(xì)小絮狀物，管口開(kāi)裂，管壁變薄，透明度增加。在70℃ PBS 溶液中加速降解2 d 后，該小管成白色糊狀。 結(jié)論 制備的新型可降解人工淚小管具有良好的力學(xué)性能和吸水溶脹性，便于手術(shù)操作，可支撐淚道，利于淚液的流通，防止淚小管粘連，有望成為一種治療淚道阻塞的新材料。
配制了與人體軟組織性能相近的水凝膠人造軟組織。采用由光學(xué)平臺(tái)、相機(jī)及支架、相機(jī)光源等組成的圖像采集設(shè)備，記錄嵌入在軟組織內(nèi)標(biāo)識(shí)物的連續(xù)位移，研究穿刺過(guò)程中軟組織的變形規(guī)律。在分析標(biāo)識(shí)物在X方向和Y方向上位移的基礎(chǔ)上，基于反向傳播（BP）神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)，建立標(biāo)識(shí)物在Y方向上的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型。通過(guò)與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)比，神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型的擬合度在95%以上，有效數(shù)據(jù)的最大相對(duì)誤差控制在30%，最大絕對(duì)誤差為0.8 mm，能夠較好地定量預(yù)測(cè)穿刺過(guò)程中軟組織的變形。研究結(jié)果可有效提高軟組織針穿刺靶點(diǎn)精度。
本文采用靜電紡絲制備了負(fù)載王不留行黃酮苷的聚乙烯醇苯乙烯吡啶鹽（PVA-SbQ）/玉米醇溶蛋白（Zein）納米纖維，對(duì)納米纖維的表面形貌和結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察，并對(duì)其進(jìn)行了生物相容性評(píng)價(jià)。將負(fù)載王不留行黃酮苷的 PVA-SbQ/Zein 納米纖維作為實(shí)驗(yàn)組，以凡士林紗布為對(duì)照組，建立小鼠皮膚損傷模型，對(duì)兩種敷料在小鼠皮膚上的修復(fù)作用進(jìn)行組織切片觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，成功制備了負(fù)載王不留行黃酮苷的納米纖維并呈現(xiàn)良好的形貌；負(fù)載黃酮苷的 PVA-SbQ/Zein 納米纖維對(duì) L929 細(xì)胞無(wú)毒害作用，且黃酮苷的存在可以促進(jìn)細(xì)胞黏附生長(zhǎng)?；?PVA-SbQ/Zein/黃酮苷納米纖維膜的創(chuàng)傷愈合材料對(duì)小鼠傷口愈合的效果要優(yōu)于凡士林紗布。