目的 構(gòu)建信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子3（STAT 3）基因短發(fā)夾RNA（shRNA）表達(dá)質(zhì)粒，探討STAT 3抑制后對(duì)胃癌MKN-45細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲的影響。 方法 根據(jù)STAT 3 mRNA 編碼序列，設(shè)計(jì)RNA干擾靶點(diǎn)，構(gòu)建STAT 3基因的特異性小RNA干擾質(zhì)粒 （psiRNA-H1/STAT 3） ，使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染MKN-45細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、psiRNA-H1轉(zhuǎn)染組和psiRNA-H1/STAT 3轉(zhuǎn)染組。通過(guò)RT-PCR和Western blot檢測(cè)STAT 3特異性小RNA干擾基因?qū)ξ赴┘?xì)胞STAT 3 mRNA和蛋白表達(dá)的影響； MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率； 采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后對(duì)MKN-45細(xì)胞凋亡的影響； 采用Boyden小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后MKN-45細(xì)胞侵襲力的變化。結(jié)果 成功轉(zhuǎn)染重組體的MKN-45細(xì)胞中STAT 3 mRNA和蛋白表達(dá)明顯下降（ P ＜ 0.05）。psiRNA-H1/STAT 3轉(zhuǎn)染組各時(shí)相均明顯抑制MKN-45細(xì)胞生長(zhǎng)，且MKN-45細(xì)胞凋亡率為34.26% ，相比對(duì)照組（3.75% ）和psiRNA-H1轉(zhuǎn)染組（4.43% ）明顯升高（ P ＜ 0.01） 。另外，psiRNA-H1/STAT 3轉(zhuǎn)染組MKN-45細(xì)胞侵襲力較另外2組明顯減弱（ P ＜ 0.01）。結(jié)論 成功構(gòu)建了針對(duì)STAT 3基因的shRNA表達(dá)載體，通過(guò)轉(zhuǎn)染MKN-45細(xì)胞，在體外能有效抑制人胃癌細(xì)胞STAT 3 mRNA和蛋白表達(dá)，細(xì)胞增殖、侵襲能力減弱并且促進(jìn)細(xì)胞凋亡，為STAT 3基因靶向治療提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。