目的 探討博萊霉素誘導小鼠肺纖維化模型中, Krüppel 樣因子4( KLF4) 的表達及其意義。方法 C57BL/6 小鼠隨機分為生理鹽水對照組( Control) 和博萊霉素組( BLM) , 經(jīng)氣管內(nèi)注入博萊霉素( 2. 5 mg/kg) 建立實驗性小鼠肺纖維化模型, 注入等量生理鹽水作為對照組, 分別于術后第12 h、1 d、2 d、3 d、7 d、14 d 及28 d 取材, 采用HE 染色和Masson 染色觀察肺組織病理變化及膠原的沉積部位和數(shù)量, 實時定量PCR 法和免疫組織化學法分別檢測各組肺組織中KLF4 mRNA 和蛋白表達水平。結果 博萊霉素誘導的小鼠肺纖維化過程中, 第1、2 及3 d 表現(xiàn)為急性炎癥; 第7 d 炎癥加重, 并出現(xiàn)膠原沉積; 第14 d 肺泡結構塌陷, 膠原沉積明顯; 第28 d 肺泡結構基本正常, 炎癥程度和膠原沉積較輕。與對照組相比, 博萊霉素組小鼠肺組織中KLF4 mRNA 的表達水平第1 d 開始升高, 而后降低, 第3 d 達最低后逐漸升高直至第28 d。博萊霉素組小鼠肺組織中KLF4 蛋白的表達趨勢與mRNA 水平基本一致, 第1 d 開始升高, 而后降低, 第3 d 達最低后逐漸增加至第14 d 后再次降低。結論 KLF4 在博萊霉素致肺纖維化過程中呈現(xiàn)明顯的動態(tài)變化, 并可能參與了肺纖維化的發(fā)生與發(fā)展。
目的探討阿托伐他汀對實驗性肺纖維化的干預作用及機制。 方法將C57BL/6小鼠隨機分為對照組、博萊霉素組和阿托伐他汀組,博萊霉素組和阿托伐他汀組一次性經(jīng)氣管內(nèi)注入博萊霉素(2.5 mg/kg)建立實驗性小鼠肺纖維化模型,對照組注入等量生理鹽水。阿托伐他汀組在氣管滴注博萊霉素后每日1次灌胃給予阿托伐他汀10 mg·kg-1·d-1。分別于術后第3、14及28 d處死動物,采用HE染色、Masson染色方法觀察肺組織病理變化以及膠原的沉積部位和數(shù)量,實時定量PCR法和免疫組織化學法分別檢測各組肺組織中Krüppel樣因子4(KLF4)mRNA和蛋白表達水平,以及明膠酶譜分析法檢測各組肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)的活性。 結果(1)博萊霉素造模后,小鼠肺組織第3 d表現(xiàn)為急性炎癥,第14 d膠原沉積加重,肺泡結構破壞,第28 d肺泡結構、炎癥程度及膠原沉積較第14 d減輕。阿托伐他汀組各時間點炎癥程度和膠原沉積較博萊霉素組均明顯減輕。(2)阿托伐他汀組各時間點KLF4表達水平明顯低于博萊霉素組(P均<0.05),其中第3 d阿托伐他汀組KLF4 mRNA表達水平(0.502±0.261)高于博萊霉素組(0.326±0.164,P<0.05),但其蛋白表達水平(0.048±0.015)低于博萊霉素組(0.130±0.017),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(3)染博萊霉素后第3 d(3.136±1.321)和第14 d(3.449±0.356),小鼠肺組織MMP-2活性較對照組(0.983±0.147)明顯上調(diào)(P<0.05),而阿托伐他汀干預后兩組MMP-2的活性(2.191±0.800,2.506±0.761)明顯下調(diào)(P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論在實驗性肺纖維化中,阿托伐他汀可能是通過對KLF4的調(diào)節(jié)來實現(xiàn)其抗炎和抗纖維化的作用。