目的 構(gòu)建胰腺癌細(xì)胞生存蛋白(survivin)表達(dá)的RNA干擾(RNAi)抑制載體，并研究其對(duì)survivin表達(dá)的抑制作用。方法 用免疫熒光技術(shù)和RT-PCR檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞PANC-1中survivin及其mRNA的表達(dá)，并把survivin基因克隆到T載體進(jìn)行測(cè)序； 構(gòu)建針對(duì)survivin缺失堿基基因和survivin基因的RNAi載體si-svv-1和si-svv-2，用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞PANC-1后，用RT-PCR、DNA梯狀電泳及流式細(xì)胞術(shù)分析比較2種干擾載體對(duì)survivin mRNA表達(dá)的抑制情況和檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果 survivin在胰腺癌細(xì)胞PANC-1中高表達(dá)； si-svv-2對(duì)survivin mRNA的表達(dá)抑制率達(dá)(72.43±8.04)%，而si-svv-1為0； si-svv-2能誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞PANC-1的凋亡, 72 h細(xì)胞凋亡率達(dá)（12.36±1.44）%。結(jié)論 本研究成功建立胰腺癌細(xì)胞survivin表達(dá)RNAi抑制載體，該載體可特異有效地抑制胰腺癌細(xì)胞PANC-1 survivin的表達(dá)并誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞PANC-1凋亡。
目的 探討載脂蛋白（Apo）AⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇多態(tài)性與膽囊膽固醇結(jié)石病的關(guān)系，揭示膽固醇結(jié)石病的遺傳易感性。方法 應(yīng)用多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）對(duì)膽固醇結(jié)石病患者及正常對(duì)照者ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇的限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性進(jìn)行研究，檢測(cè)ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因位點(diǎn)XmnⅠ及MspⅠ。結(jié)果 膽石組和對(duì)照組均以X1、M1等位基因?yàn)橹?，多為X1X1、M1M1純合子基因型。膽石組各基因型和各等位基因頻率與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。膽石組女性患者正常型基因X1X1純合子頻率和正常等位基因X1的頻率低于對(duì)照組女性，突變型基因X1X2雜合子、X2X2純合子以及突變型等位基因X2的頻率均高于對(duì)照組女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。膽石組男性患者正常型基因M1M1純合子頻率低于對(duì)照組男性，而突變型基因M1M2雜合子頻率高于對(duì)照組男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇XmnⅠ位點(diǎn)的多態(tài)性可能與女性膽囊膽固醇結(jié)石病有關(guān)，而MspⅠ位點(diǎn)的多態(tài)性可能與男性膽囊膽固醇結(jié)石病有關(guān)。