建立人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480裸鼠移植瘤模型，觀察8肽生長(zhǎng)抑素(SMS 201-995，SMS)對(duì)移植瘤的作用及機(jī)理。結(jié)果∶SMS組及SMS+PG(5肽胃泌素)組移植瘤的體積、重量、瘤細(xì)胞內(nèi)cAMP、DNA、蛋白質(zhì)含量、S期和G2M期細(xì)胞數(shù)及增殖指數(shù)均顯著低于PG組及對(duì)照組，PG組顯著高于對(duì)照組；而G0/G1期細(xì)胞數(shù)則顯著高于PG組及對(duì)照組，PG組顯著低于對(duì)照組。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：生長(zhǎng)抑素具有直接抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480移植瘤生長(zhǎng)的作用，又可抑制胃泌素對(duì)移植瘤的促增殖作用。這種作用機(jī)理是通過(guò)抑制瘤細(xì)胞內(nèi)cAMP、DNA和蛋白質(zhì)的合成，從而抑制瘤細(xì)胞從G0/G1期進(jìn)入到S期和G2M期。這為大腸癌患者應(yīng)用生長(zhǎng)抑素類(lèi)似物進(jìn)行內(nèi)分泌治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
目的探討連續(xù)多次注射富血小板血漿（platelet-rich plasma，PRP）對(duì)脂肪移植成活率及移植質(zhì)量的影響，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法取接受吸脂手術(shù)的1名25歲健康女性自愿捐贈(zèng)的大腿后外側(cè)區(qū)脂肪，采用靜置法純化脂肪顆粒；抽取其外周靜脈血，經(jīng)兩次200 × g離心10 min收集PRP；將PRP與10%CaCl2溶液以10∶1混合。選取5周齡雌性裸鼠24只，體重（20 ± 3）g，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組（n=12）。實(shí)驗(yàn)組于裸鼠左、右側(cè)背部皮下各注射脂肪顆粒與PRP（10∶2）混合物0.8 mL，對(duì)照組注射相同劑量脂肪顆粒與生理鹽水（10∶2）混合物。在首次移植后5、10 d，兩組再次分別注射PRP與生理鹽水0.14 mL。移植后觀察裸鼠存活情況；于首次移植后15、30、90、180 d，兩組取標(biāo)本進(jìn)行大體觀察，測(cè)定組織塊重量與體積；組織學(xué)觀察組織與細(xì)胞形態(tài)特征，計(jì)算壞死面積比與微血管計(jì)數(shù)。結(jié)果裸鼠均成活至實(shí)驗(yàn)完成，兩組移植部位均未出現(xiàn)感染及破潰。各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組組織塊表面血管生成以及橫切面液化、壞死情況均好于對(duì)照組。首次移植后15、30、90 d實(shí)驗(yàn)組組織塊重量及體積均顯著大于對(duì)照組（P lt; 0.05），180 d時(shí)兩組組織塊重量及體積相似（P gt; 0.05）。組織學(xué)觀察示實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)脂肪細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)均清晰，中心區(qū)空泡逐漸增大，無(wú)明顯壞死物質(zhì)及鈣化發(fā)生；對(duì)照組脂肪細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)逐漸紊亂，且出現(xiàn)大量壞死物質(zhì)，鈣化明顯。實(shí)驗(yàn)組15、180 d時(shí)壞死面積比均小于對(duì)照組，微血管計(jì)數(shù)均多于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論180 d內(nèi)連續(xù)多次注射PRP輔助脂肪移植能促進(jìn)脂肪成活并提高移植質(zhì)量。
目的探討血管基質(zhì)片段（vascular stromal fraction，SVF）輔助游離脂肪移植促進(jìn)其早期存活的相關(guān)機(jī)制。 方法取5例行腹部抽脂手術(shù)女性患者自愿捐贈(zèng)的脂肪組織分離、培養(yǎng)SVF。4～6周齡裸鼠24只（體重15～18 g），將裸鼠背部左、右側(cè)隨機(jī)分為A、B組（n=24），采用Coleman技術(shù)分別于A、B組裸鼠背部皮下移植脂肪0.5 mL和含5 × 105個(gè)SVF的脂肪0.5 mL。移植后1、3、5、7 d分別取6只裸鼠，取出移植脂肪組織，行大體觀察、CD31免疫組織化學(xué)染色及Western blot檢測(cè)分析。 結(jié)果隨著移植時(shí)間增加，A、B組移植脂肪組織濕重均呈上升趨勢(shì)，但各時(shí)間點(diǎn)A、B組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。移植后1、3 d兩組均未見(jiàn)CD31陽(yáng)性細(xì)胞；5、7 d B組CD31陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)顯著高于A組（P lt; 0.05），兩組7 d時(shí)CD31陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)顯著高于5 d時(shí)（P lt; 0.05）。Western blot檢測(cè)示，兩組移植脂肪中VEGF蛋白表達(dá)在移植后第3天達(dá)峰值，隨后開(kāi)始下降；1、3、5 d B組VEGF蛋白表達(dá)明顯高于A組（P lt; 0.05）。兩組移植脂肪中HGF蛋白表達(dá)在移植后前5 d均保持在較高水平，7 d開(kāi)始下降，B組均明顯高于A組（P lt; 0.05）。 結(jié)論在游離脂肪移植早期，SVF通過(guò)旁分泌生長(zhǎng)因子促進(jìn)移植脂肪血管生成。
目的探討與聚乳酸聚乙酸共聚物[poly（lactide-co-glycolide），PLGA]支架復(fù)合后的成肌細(xì)胞體外經(jīng)軟骨來(lái)源形成蛋白2（cartilage-derived morphogenetic protein 2，CDMP-2）聯(lián)合TGF-β1誘導(dǎo)后，能否在裸鼠體內(nèi)異位構(gòu)建組織工程軟骨。 方法取1歲齡雄性比格犬股直肌肌肉分離培養(yǎng)成肌細(xì)胞，取第4代成肌細(xì)胞接種于PLGA支架，加入含CDMP-2與TGF-β1的軟骨誘導(dǎo)液體外培養(yǎng)2周。實(shí)驗(yàn)分為4組：A組為經(jīng)軟骨誘導(dǎo)的成肌細(xì)胞-PLGA復(fù)合物組，B組為未經(jīng)軟骨誘導(dǎo)的成肌細(xì)胞-PLGA復(fù)合物組，C組為經(jīng)軟骨誘導(dǎo)的單純PLGA支架組，D組為單純PLGA支架組。于24只裸鼠背部皮下兩側(cè)制備4個(gè)皮下腔隙，分別植入4組材料。術(shù)后8、12周處死裸鼠，取材行大體觀察、HE及甲苯胺藍(lán)染色、Ⅰ型膠原及Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色觀察，RT-PCR檢測(cè)Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原、蛋白聚糖（Aggrecan）、Sox9 mRNA表達(dá)，阿利新藍(lán)染色檢測(cè)糖胺聚糖（glycosaminoglycans，GAG）含量，生物力學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本壓縮彈性模量。 結(jié)果A組標(biāo)本術(shù)后8周呈類(lèi)軟骨樣，乳白色，表面光潔，有彈性；12周時(shí)外觀和彈性與正常軟骨相似。B組術(shù)后8周僅殘余少許組織，12周已完全降解；C、D組標(biāo)本術(shù)后8周均降解消失。HE染色示A組8、12周時(shí)有成熟軟骨陷窩形成；B組8周時(shí)組織內(nèi)未見(jiàn)軟骨陷窩形成。甲苯胺藍(lán)染色示A組8、12周時(shí)組織內(nèi)新生軟骨細(xì)胞形成，細(xì)胞橢圓，排列整齊，細(xì)胞陷窩形成，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)均藍(lán)染陽(yáng)性；B組8周時(shí)組織內(nèi)未見(jiàn)藍(lán)染的細(xì)胞外基質(zhì)。Ⅰ、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色示A組8、12周時(shí)均呈陽(yáng)性表達(dá)；B組8周時(shí)呈陰性表達(dá)。RT-PCR檢測(cè)示術(shù)后8、12周A組均可見(jiàn)Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原、Aggrecan和Sox9 mRNA表達(dá)，B組均呈陰性。術(shù)后12周A組壓縮彈性模量為（90.79 ± 1.78） MPa，GAG含量為（10.20 ± 1.07）μg/mL與正常半月板相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論體外CDMP-2聯(lián)合TGF-β1軟骨誘導(dǎo)的比格犬成肌細(xì)胞復(fù)合PLGA支架后具備在裸鼠體內(nèi)異位構(gòu)建組織工程軟骨的能力。
【摘 要】 目的 探討毛乳頭細(xì)胞對(duì)表皮干細(xì)胞與同種異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)構(gòu)建的組織工程皮膚血管化的影響。 方法 取門(mén)診包皮環(huán)切術(shù)患者皮膚，用于表皮細(xì)胞培養(yǎng)；取孕19、20 周引產(chǎn)胎兒頭部皮膚，用于毛乳頭細(xì)胞培養(yǎng)；患者及家屬均知情同意。以中性蛋白酶聯(lián)合胰蛋白酶消化、分離表皮細(xì)胞，Ⅳ型膠原黏附法分選表皮干細(xì)胞；以Ⅰ型膠原酶消化法分離毛乳頭，常規(guī)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)。以同種異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)為支架，在真皮基質(zhì)的真皮乳頭側(cè)種植毛乳頭細(xì)胞，基底膜側(cè)種植表皮干細(xì)胞構(gòu)建實(shí)驗(yàn)組組織工程皮膚替代物；對(duì)照組組織工程皮膚替代物不種植毛乳頭細(xì)胞。取6 ～ 8 周齡BALB/C-nu 裸鼠60 只，隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組（n=30）；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背部制造1 cm × 1 cm 大小全層皮膚缺損模型，將兩組組織工程皮膚替代物移植修復(fù)創(chuàng)面，2 周后觀察移植皮膚成活率。術(shù)后2、4 周，取移植皮膚替代物標(biāo)本，行HE 及免疫組織化學(xué)染色，觀察移植皮膚替代物CD31 表達(dá)水平，并計(jì)算兩組標(biāo)本血管密度。 結(jié)果 Ⅳ型膠原分選后表皮細(xì)胞同時(shí)表達(dá)角蛋白19、β1 整合素，提示為表皮干細(xì)胞。由毛乳頭培養(yǎng)出的細(xì)胞表達(dá)α 平滑肌肌動(dòng)蛋白，提示為毛乳頭細(xì)胞。動(dòng)物移植術(shù)后2 周，實(shí)驗(yàn)組移植皮膚成活率為93.3%（28/30），對(duì)照組為80.0%（24/30），比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.31，P=0.00）。HE 染色觀察示實(shí)驗(yàn)組表皮層達(dá)12 層，表皮細(xì)胞體積較大；對(duì)照組表皮層達(dá)4 ～ 6 層，表皮細(xì)胞體積較小。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后2、4 周，血管密度分別為（38.56 ± 2.49）個(gè)/mm2 和（49.12 ± 2.39）個(gè)/mm2，對(duì)照組分別為（25.16 ± 3.73） 個(gè) / mm2 和（36.26 ± 3.24） 個(gè) / mm2，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。 結(jié)論 毛乳頭細(xì)胞可促進(jìn)移植皮膚替代物血管形成，利于表皮層重建，提高組織工程皮膚移植成活率。
目的 人Ⅰ型前膠原基因（Col Ⅰ A1）反義寡核苷酸（antisense oligodeoxyneucleotide，ASODN）對(duì)體外培養(yǎng)的人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞有抑制膠原合成作用，擬進(jìn)一步探討Col Ⅰ A1 ASODN 對(duì)裸鼠移植模型體內(nèi)的人增生性瘢痕的膠原合成作用。 方法 SPF 級(jí)BALB/c-nunu 品系6 ～ 8 周齡雌性裸鼠60 只，體重約20 g；取行瘢痕切除手術(shù)患者自愿捐贈(zèng)的瘢痕組織塊去表皮后，移植至裸鼠背部肩胛內(nèi)側(cè)皮下，每只裸鼠移植1 塊，制備人增生性瘢痕裸鼠移植模型。將58 只成功制備模型的裸鼠根據(jù)處理方法不同，隨機(jī)分成3 組，于瘢痕移植2 周根據(jù)分組行經(jīng)皮穿刺瘢痕內(nèi)注射。A 組（n=20）：5 μL 濃度為3 mmol/L Col Ⅰ A1 ASODN、3 μL 脂質(zhì)體、92 μL Opti-MEM Ⅰ減血清培養(yǎng)基；B 組（n=20）： 3 μL 脂 質(zhì)體、97 μL Opti-MEM Ⅰ減血清培養(yǎng)基；C 組（n=18）：100 μL Opti-MEM Ⅰ減血清培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)最初2 周每天注射1 次，之后隔天1 次，至實(shí)驗(yàn)取材。注射后2、4、6 周，對(duì)存活裸鼠進(jìn)行瘢痕硬度測(cè)量后，處死裸鼠取瘢痕組織行膠原染色組織學(xué)觀察以及透射電鏡觀察；提取細(xì)胞總RNA 后行RT-PCR 測(cè)定Col Ⅰ A1 mRNA 相對(duì)含量；ELISA 法行Col Ⅰ A1 蛋白定量分析。 結(jié)果 注射后6 周內(nèi)17 只裸鼠死亡；共41 只裸鼠40 塊瘢痕組織符合實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，納入實(shí)驗(yàn)；A、B、C 組各14、13、14 只。注射后2 周，3 組間瘢痕硬度比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；4、6 周時(shí)A 組與B、C 組比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），B、C 組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。隨時(shí)間延長(zhǎng)，組織學(xué)觀察示3 組Ⅲ型膠原表達(dá)上升，A 組最明顯，Ⅰ型膠原排列規(guī)則。透射電鏡觀察示A 組成纖維細(xì)胞退化，膠原纖維排列更趨于一致；B、C 組膠原纖維排列也逐漸規(guī)則。注射后2、4 周3 組間Col Ⅰ A1 mRNA 和蛋白表達(dá)量比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；6 周時(shí)A 組與B、C 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），B、C 組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 在人增生性瘢痕裸鼠移植模型的瘢痕內(nèi)注射Col Ⅰ A1 ASODN 可抑制Col Ⅰ A1 mRNA 及Ⅰ型膠原表達(dá)，促進(jìn)瘢痕組織成熟、軟化，脂質(zhì)體可促進(jìn)該抑制效果。
目的 目前組織工程骨（tissue engineered bone，TEB）缺乏有效可行的儲(chǔ)存、運(yùn)輸方法。評(píng)估TEB 經(jīng)過(guò)凍干處理后其成骨活性變化及其異位成骨能力，探索新的TEB 儲(chǔ)存和運(yùn)輸策略。 方法 取志愿者捐獻(xiàn)的骨髓和骨組織分別培養(yǎng)hBMSCs 和制備脫鈣骨基質(zhì)（decalcified bone matrix，DBM），取第3 代hBMSCs 與DBM 復(fù)合構(gòu)建TEB，分別于體外孵育3、5、7、9、12、15 d 經(jīng)過(guò)低溫干燥后得到凍干組織工程骨（freeze-dried tissue engineered bone，F(xiàn)TEB），并將體外培養(yǎng)不同時(shí)間點(diǎn)的TEB 和FTEB 行掃描電鏡觀察。Western blot 法檢測(cè)TEB 和FTEB 內(nèi)成骨相關(guān)蛋白BMP-2、TGF-β1、IGF-1 的變化。將FTEB、TEB 和DBM 分別移植于30 只6 周齡BALB/C 裸鼠皮下進(jìn)行異位成骨實(shí)驗(yàn)（n=10），并行X 線片評(píng)分、CT 值檢測(cè)以及HE 染色觀察。 結(jié)果 掃描電鏡觀察示，TEB 中種子細(xì)胞保持正常形態(tài)，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)分泌細(xì)胞外基質(zhì)逐漸增加；FTEB 內(nèi)的種子細(xì)胞脫水皺縮而亡，細(xì)胞外基質(zhì)位于疏松的DBM 支架材料中。Westernblot 檢測(cè)示，TEB 和FTEB 內(nèi)BMP-2、TGF-β1 和IGF-1 表達(dá)均為陽(yáng)性，除體外培養(yǎng)15 d TEB 和FTEB 的TGF-β1 蛋白積分吸光度（IA）比值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）外，其余各時(shí)間點(diǎn)各蛋白含量比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。移植術(shù)后4 周各種移植物未見(jiàn)明顯鈣化；術(shù)后8、12 周，TEB 和FTEB 移植裸鼠皮下可以實(shí)現(xiàn)較好的異位成骨。通過(guò)X線片評(píng)分、CT 值比較移植物鈣化程度，TEB 和FTEB 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），而DBM 未見(jiàn)明顯鈣化。HE 染色示TEB 和FTEB 出現(xiàn)鈣化，DBM 降解吸收。 結(jié)論 FTEB 與TEB 具有相似的成骨活性，為T(mén)EB 的儲(chǔ)存和運(yùn)輸提供了一種新的策略和方法。
目的 為解決組織工程中種子細(xì)胞數(shù)量不足及為組織工程種子細(xì)胞研究提供標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞，建立永生化hBMSCs（MSCxj）系，進(jìn)一步探討MSCxj 的異位成骨能力。 方法 取凍存復(fù)蘇后生長(zhǎng)良好的第35 代和第128 代MSCxj，擴(kuò)增培養(yǎng)至2 109 個(gè)，分別與牛松質(zhì)骨復(fù)合培養(yǎng)，作為A、B 組（n=12），C 組為單純牛松質(zhì)骨（n=12）。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)48 h 和18 d 時(shí)行掃描電鏡觀察細(xì)胞在材料上的生長(zhǎng)情況。于18 只4 ～ 6 周齡裸鼠背部?jī)蓚?cè)皮下各作一3 mm小切口，將3 組共36 個(gè)標(biāo)本采用組內(nèi)隨機(jī)、組間兩兩配對(duì)分別植入切口內(nèi)。處死動(dòng)物前分別行四環(huán)素?zé)晒鈽?biāo)記。于術(shù)后4、8、12周各組分別取4 個(gè)標(biāo)本行HE、麗春紅三色、四環(huán)素?zé)晒馊旧?、鼠抗人骨鈣素單克隆抗體免疫組織化學(xué)染色觀察，并行形態(tài)學(xué)定量分析。 結(jié)果 細(xì)胞- 異種骨復(fù)合培養(yǎng)48 h，掃描電鏡觀察見(jiàn)A、B 組細(xì)胞貼附生長(zhǎng)良好；18 d 可見(jiàn)大量合成的絲狀細(xì)胞外基質(zhì)及細(xì)小顆粒樣分泌物，并覆蓋細(xì)胞。裸鼠皮下埋植實(shí)驗(yàn)：HE、麗春紅三色、四環(huán)素?zé)晒馊旧^察示，術(shù)后4 周A、B 組標(biāo)本成骨不明顯，8 周A、B 組標(biāo)本周邊及異種骨內(nèi)部孔隙有類(lèi)骨基質(zhì)沉積，12 周A、B 組標(biāo)本成骨增加，A、B 組間成骨情況比較無(wú)明顯差異；C 組各時(shí)間點(diǎn)均未見(jiàn)骨質(zhì)形成。鼠抗人骨鈣素單克隆抗體免疫組織化學(xué)染色顯示，A、B 組8 周及12 周骨陷窩內(nèi)骨鈣素染色呈陽(yáng)性。形態(tài)學(xué)定量分析顯示，術(shù)后8 周A、B組骨長(zhǎng)入率分別為5.64% ± 2.68%和4.92% ± 2.95%，術(shù)后12 周分別為13.94% ± 2.21% 和14.34% ± 3.46%，兩組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；組內(nèi)術(shù)后12周骨長(zhǎng)入率均高于術(shù)后8 周，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 MSCxj 與原代培養(yǎng)hBMSCs 一樣具有良好的異位成骨能力，可作為骨組織工程的種子細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)及臨床研究。
目的 探討以醫(yī)用多孔高密度聚乙烯（high-density polyethylene，HDPE，商品名為Medpor)為內(nèi)支撐，外裹聚羥基乙酸（polyglycolic acid,PGA）的支架，接種軟骨細(xì)胞后,于裸鼠體內(nèi)構(gòu)建組織工程睪丸假體的可行性及特點(diǎn)。方法 取新生雌性長(zhǎng)楓雜交仔豬1只，取四肢大關(guān)節(jié)表面軟骨，制備密度為5×107/ml的軟骨細(xì)胞懸液。將其接種于長(zhǎng)短半徑分別為6mm和4mm的Medpor，外裹2mm PGA的支架，體外培養(yǎng)2周。取4周齡BALB/C裸鼠10只，隨機(jī)分為兩組(n=5) 。實(shí)驗(yàn)組：采用制備的細(xì)胞支架復(fù)合物植入裸鼠背部皮下；對(duì)照組：采用Medpor-PGA復(fù)合支架植入裸鼠皮下。8周后處死裸鼠取材，行大體觀察、組織學(xué)及免疫組織化學(xué)觀察。結(jié)果 大體觀察：實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本形狀與體積未發(fā)生變化，色澤及彈性與正常軟骨相似，軟骨與Medpor接合緊密；對(duì)照組無(wú)軟骨形成，外包裹纖維樣組織。實(shí)驗(yàn)組：HE染色見(jiàn)軟骨內(nèi)存在大量成熟的軟骨陷窩，無(wú)血管長(zhǎng)入，部分PGA尚未降解完全；甲苯胺藍(lán)染色示細(xì)胞外基質(zhì)具有異染特性；藏紅花染色示基質(zhì)中大量蛋白聚糖沉積；Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。對(duì)照組：Medpor被大量富含血管的纖維組織包裹。結(jié)論 利用Medpor與PGA復(fù)合的支架，接種軟骨細(xì)胞后，可于體內(nèi)構(gòu)建出具有預(yù)構(gòu)睪丸形態(tài)且組織學(xué)良好的Medpor-軟骨復(fù)合體。
【摘要】 目的 觀察低頻超聲（20 kHz）輻照聯(lián)合靜脈注射微泡造影劑SonoVue對(duì)裸鼠前列腺癌（Du145）移植瘤的抑瘤效應(yīng)，并探討其可能的抑瘤機(jī)制?！》椒ā⊥ㄟ^(guò)細(xì)胞移植和瘤塊移植方法建立24只裸鼠前列腺癌Du145移植瘤模型，隨機(jī)分為超聲微泡組、單純超聲組、單純微泡組和對(duì)照組，每組各6只。超聲微泡組：尾靜脈注射0.2 mL SonoVue的同時(shí)對(duì)瘤體行20 kHz超聲輻照，輻照強(qiáng)度200 mW/cm2；單純超聲組：尾靜脈注射生理鹽水0.2 mL，同時(shí)超聲輻照2 min；單純微泡組：尾靜脈注射SonoVue 0.2 mL同時(shí)行假照，各組均隔天1次，共3次，對(duì)照組不做任何處理。治療后測(cè)量瘤體大小，繪制瘤體生長(zhǎng)曲線，計(jì)算抑瘤率。首次治療后14 d剝離瘤體，通過(guò)光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察腫瘤組織病理改變。免疫組織化學(xué)方法觀察CD34陽(yáng)性染色血管，計(jì)算腫瘤微血管密度（micro vessel density，MVD），比較各組間MVD的差異?！〗Y(jié)果 24只裸鼠均成功植瘤。治療后超聲微泡組瘤體體積均數(shù)明顯小于其他3組（Plt;0.05），抑瘤率為62.7%。光學(xué)顯微鏡下超聲微泡組瘤體組織大部分損傷壞死，電子顯微鏡下超聲微泡組腫瘤內(nèi)微血管的內(nèi)皮細(xì)胞損傷，線粒體腫大，基底膜斷裂。超聲微泡組瘤體內(nèi)CD34陽(yáng)性染色微血管數(shù)減少，其MVD值顯著低于其他各組?！〗Y(jié)論 20 kHz低頻超聲輻照聯(lián)合微泡造影劑SonoVue可有效抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的生長(zhǎng)，其抑瘤機(jī)制可能是通過(guò)超聲空化效應(yīng)破壞腫瘤的微血管實(shí)現(xiàn)的。【Abstract】 Objective To investigate the anti-tumor effect induced by low-frequency ultrasound (20 kHz) radiation combined with intravenous injection of microbubbles on human prostate carcinoma xenograft in nude mice, and to discuss its probable mechanism. Methods Human prostate carcinoma xenograft model in 24 nude mice were established with human prostate carcinoma Du145 cells inoculation and sub-graft through mice, which were randomly divided into ultrasound+microbubble, ultrasound, microbubble, and control group, with 6 mice in each group. In the ultrasound+microbubble group, 0.2 mL SonoVue was injected intravenously, followed by 20 kHz ultrasound exposure of 200 mW/cm2 at every other day for 3 times totally. Mice in the ultrasound group and the microbubbles group were only treated with ultrasound radiation and microbubbles injection, respectively. The volume of gross tumors was measured, and tumor growth curve was drawn. The ratio of anti-tumor growth was calculated. The mice were sacrificed 14 days after the last ultrasound exposure. Specimens of the exposed tumor tissues were obtained and observed pathologically under light microscope and transmission electron microscope. CD34 positive vessels were counted in all the tumor slices by immunohistochemistry, and the micro-vessels density（MVD）of the tumor was also calculated. Results Du145 prostate tumor model was successfully established in all the mice. The average gross tumor volume of the ultrasound+microbubble group was significant lower compared with the other two groups after treatment (Plt;0.05), and the ratio of anti-tumor growth was 62.7%. Histological examination showed signs cell injury in the ultrasound+microbubble group. Electron microscopic examination revealed that the endothelium of vessels in the tumor was injured. The amount of CD34 positive vessels and MVD of the ultrasound+microbubble group was less than that of the other two groups. Conclusion The low-frequency ultrasound of 20 kHz exposure combined with microbubbles can be used to ablate human prostate carcinoma xenograft in nude mice, which is probably realized through micro-vessels destroyed by cavitation effect of ultrasound.