華西醫(yī)學期刊出版社
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  • 體外Akt基因轉染對骨髓間充質干細胞葡萄糖轉運載體-4表達和易位的影響

    目的 探討葡萄糖轉運載體(GLUT)-4是否參與骨髓間充質干細胞(MSCs)的葡萄糖轉運以及Akt基因轉染提高MSCs耐缺氧能力是否與GLUT-4易位和表達有關。方法 將經(jīng)Akt基因轉染和未轉染的MSCs均行常氧(5% CO2)和缺氧(94% N2、1%O2和5%CO2)37 ℃孵育8 h。放射同位素法檢測氚標-脫氧葡萄糖(3H-G)的攝取量,免疫細胞化學染色、Western blot和RT-PCR分別檢測GLUT-4的蛋白質和mRNA表達。結果 ①缺氧轉染組的3H-G攝取量是缺氧非轉染組的(1.39±0.13)倍(P<0.05),但仍低于常氧非轉染組(P<0.05)。②MSCs在常氧或缺氧、Akt基因轉染或無轉染的條件下均可表達GLUT-4蛋白。與常氧非轉染組比較,缺氧非轉染組GLUT-4 mRNA和蛋白的表達水平明顯降低(P<0.05)。③與缺氧非轉染組比較,缺氧轉染組的GLUT-4 mRNA〔(1.756±0.152)倍〕和蛋白〔細胞總GLUT-4蛋白(1.653±0.312)倍,細胞膜GLUT-4蛋白(2.041±0.258)倍〕的表達水平明顯提高(P<0.05),且GLUT-4蛋白易位明顯; 但與常氧非轉染組比較,其GLUT-4 mRNA和蛋白的表達水平仍較低(P<0.05)。④MSCs的3H-G攝取量與細胞膜中GLUT-4蛋白的表達呈正相關(r=0.415,P=0.001)。結論 GLUT-4可能參與MSCs的葡萄糖轉運,Akt基因提高MSCs耐缺氧能力可能與提高GLUT-4的表達和易位有關。

    發(fā)表時間:2016-09-08 10:50 導出 下載 收藏 掃碼
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