華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"郝廷" 1條結(jié)果
  • BMSCs 來源成骨細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)合殼聚糖- 羥基磷灰石多孔支架構(gòu)建血管化組織工程骨研究

    目的 探討大鼠BMSCs 來源的成骨細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)合殼聚糖- 羥基磷灰石多孔支架植入大鼠橈骨缺損處的成骨作用和成血管作用。 方法 取分離培養(yǎng)至第3 代的SD 大鼠BMSCs 行成骨和成內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)并鑒定。分別將內(nèi)皮細(xì)胞(A 組)、成骨細(xì)胞(B 組)、混合細(xì)胞(成骨細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞比例為1 ∶ 1,C 組)均勻滴加于殼聚糖- 羥基磷灰石多孔支架上制備3 組細(xì)胞- 支架復(fù)合物,MTT 檢測支架內(nèi)細(xì)胞增殖活性。取2 月齡雄性SD 大鼠30 只,制作大鼠橈骨5 mm 長缺損模型并分別植入3 組細(xì)胞- 支架復(fù)合物(n=10)。術(shù)后4、8、12 周分別取移植物行HE 染色觀察,CD34免疫組織化學(xué)染色計(jì)數(shù)微血管密度,RT-PCR 法檢測骨橋蛋白(osteopontin,OPN)和骨保護(hù)素(osteoprotegrin,OPG)mRNA 表達(dá)。 結(jié)果 BMSCs 成骨誘導(dǎo)7 d 后ALP 染色可見細(xì)胞質(zhì)內(nèi)藍(lán)染顆粒,細(xì)胞核呈紅染;內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)14 d 后,CD34 免疫細(xì)胞化學(xué)染色可見細(xì)胞內(nèi)棕色顆粒。MTT 檢測示3 組細(xì)胞活性隨時(shí)間延長逐漸升高。HE 染色示,術(shù)后12 周A 組未見明顯類骨質(zhì)形成,而有較密集的微血管結(jié)構(gòu)及較多纖維組織形成;B、C 組可見均質(zhì)的類骨質(zhì),呈條索狀和島狀分布,可見大量成骨樣細(xì)胞存在。術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)A、C 組微血管密度均顯著高于B 組(P lt; 0.05);A 組術(shù)后12 周微血管密度高于C 組(P lt; 0.05),其余2 個(gè)時(shí)間點(diǎn)A、C 組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。A 組3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)OPN 和OPG mRNA 表達(dá)水平均較低,與B、C 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);B、C 組分別于術(shù)后8、12 周OPN mRNA 表達(dá)達(dá)峰值,4 周時(shí)OPG mRNA 表達(dá)達(dá)峰值。 結(jié)論 BMSCs 來源的成骨細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞按1 ∶ 1 比例共培養(yǎng)于殼聚糖- 羥基磷灰石多孔支架作為組織工程骨移植物,可以促進(jìn)大鼠橈骨缺損部位骨的形成和血管化,促進(jìn)骨缺損愈合。

    發(fā)表時(shí)間:2016-08-31 04:23 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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