華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"高同斌" 1條結(jié)果
  • 人羊水來源干細(xì)胞參與小鼠損傷肌肉修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究

    目的 研究人羊水來源干細(xì)胞(human amniotic fluid colony derived stem cells,hAFCSCs)是否參與小鼠肌肉損傷修復(fù)過程,探討應(yīng)用hAFCSCs 治療肌肉損傷的方法及可行性。 方法 B 超引導(dǎo)下穿刺抽取人孕中期羊水,體外分離、培養(yǎng)得到hAFCSCs,取第6 ~ 8 代細(xì)胞備用,同時(shí)提取總RNA 行RT-PCR 鑒定干細(xì)胞相關(guān)基因。取16 只6 ~ 8周齡Nod/Scid 小鼠,體重20 ~ 24 g,利用心肌毒素聯(lián)合X 線照射建立雙側(cè)脛骨前肌肌肉損傷模型,右側(cè)脛骨前肌內(nèi)注射hAFCSCs(3.3 × 107 個(gè)/mL)30 μL 作為實(shí)驗(yàn)組,左側(cè)脛骨前肌同法注射等量完全培養(yǎng)液(含15%FBS、18%Chang B2%Chang C、1% 青鏈霉素、1%L- 谷氨酰胺的α-MEM 培養(yǎng)基)作為對照組。細(xì)胞移植術(shù)后2、4 周各處死小鼠8 只,取材行肝細(xì)胞生長因子受體(c-Met)、成肌調(diào)節(jié)因子(Myf-5)、層粘連蛋白(Laminin)、結(jié)蛋白(Desmin)與人特異性細(xì)胞核有絲分裂器(NuMa)組織免疫雙重?zé)晒馊旧^察。 結(jié)果 原代hAFCSCs 培養(yǎng)5 ~ 7 d 后可見細(xì)胞克隆形成;8 ~ 10 d 后可挑取細(xì)胞形態(tài)均一的克隆進(jìn)行穩(wěn)定傳代,6 ~ 8 代后可獲得足量的干細(xì)胞。RT-PCR 檢測示所獲得hAFCSCs 體外擴(kuò)增培養(yǎng)至第6 代仍表達(dá)干細(xì)胞相關(guān)基因。細(xì)胞移植術(shù)后2 周免疫雙重?zé)晒馊旧?,?shí)驗(yàn)組脛骨前肌內(nèi)檢測到NuMa 表達(dá),未檢測到hAFCSCs 表達(dá)肌源性細(xì)胞相關(guān)表型;術(shù)后4 周,實(shí)驗(yàn)組脛骨前肌內(nèi)檢測到NuMa 表達(dá),部分細(xì)胞同時(shí)表達(dá)NuMa和c-Met、Myf-5,部分肌纖維同時(shí)表達(dá)NuMa 和Desmin、Laminin。術(shù)后2、4 周,對照組脛骨前肌均未檢測到NuMa 表達(dá)。 結(jié)論 hAFCSCs 體外培養(yǎng)后移植到小鼠肌肉損傷部位,可參與損傷肌肉的修復(fù)過程。

    發(fā)表時(shí)間:2016-08-31 05:44 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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