目的 探討糖尿病(DM)鼠視網(wǎng)膜血管細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)在血視網(wǎng)膜屏障(BRB)破壞中的作用及玻璃體注射曲安奈德(TA)對BRB破壞的治療作用?！? 方法 60只Wistar鼠建立DM模型，分為對照組、DM 4個(gè)月組和DM 6個(gè)月組。每組各分為免疫組織化學(xué)組和BRB測定組，BRB測定組再分為未行TA治療組、TA治療1周組和2周組。大鼠玻璃體內(nèi)注射TA 5mu;l。視網(wǎng)膜鋪片免疫組織化學(xué)染色觀察視網(wǎng)膜ICAM-1的表達(dá)及形態(tài)學(xué)變化，圖像分析軟件測定內(nèi)皮細(xì)胞平均吸光度(A)［舊稱光密度（OD）］，定量ICAM-1表達(dá)。測定視網(wǎng)膜伊凡思藍(lán)(EB)含量，評價(jià)BRB的變化。 結(jié)果 免疫組織化學(xué)組:對照組視網(wǎng)膜血管無明顯ICAM-1陽性表達(dá)，同對照組相比，DM 4個(gè)月組陽性表達(dá)顯著增強(qiáng)(P＜0.001)，已出現(xiàn)毛細(xì)血管管徑粗細(xì)不一等形態(tài)學(xué)改變；DM 6個(gè)月組陽性表達(dá)進(jìn)一步增強(qiáng)(P＜0.001)，形態(tài)學(xué)改變進(jìn)一步加重，可出現(xiàn)無細(xì)胞性毛細(xì)血管。BRB測定組:各對照組間EB含量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。未行TA治療組中，兩DM組EB含量明顯高于對照組(P＜0.001)，且DM 6個(gè)月組高于4個(gè)月組(P＜0.01)。TA治療組中，各DM組EB含量均顯著降低(P＜0.001)，但組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，然而DM 4個(gè)月治療2周組已基本恢復(fù)正常(P＞0.05)，余治療組仍高于對照組(P＜0.05)。內(nèi)皮細(xì)胞 A 值與視網(wǎng)膜EB含量呈直線相關(guān)(r=－0.959)。 結(jié)論 糖尿病鼠視網(wǎng)膜ICAM-1的表達(dá)與BRB破壞呈正相關(guān)。玻璃體內(nèi)注射TA可有效減輕BRB破壞。 (中華眼底病雜志, 2006, 22: 24-27)
目的 探討可誘導(dǎo)的共刺激分子（ICOS）在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎(EAU)中的表達(dá)及意義。 方法 Lewis大鼠28只，用視網(wǎng)膜S抗原（50 mu;g）和福完全佐劑免疫24只大鼠以誘導(dǎo)EAU模型（免疫組），另外4只作為正常對照。裂隙燈顯微鏡每日觀察大鼠眼部變化。免疫組大鼠分別于免疫后第7、12、15、21天被處死，摘除其脾臟后制作冰凍連續(xù)切片并提取組織蛋白。使用多克隆抗ICOS抗體，用免疫組織化學(xué)細(xì)菌蛋白過氧化物酶（SP）法在上述組織切片上進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，并對提取的蛋白進(jìn)行Westernblotting檢測。對照組大鼠在相應(yīng)各時(shí)間點(diǎn)做同樣處理。 結(jié)果 正常脾組織中可見少量ICOS陽性細(xì)胞；分別在免疫后第7、12 d，脾臟中ICOS陽性細(xì)胞數(shù)量明顯增加，免疫后第15天時(shí)陽性細(xì)胞數(shù)量最多，21 d時(shí)陽性細(xì)胞數(shù)量減少，但仍顯著高于正常組；Westernblotting檢測結(jié)果顯示，ICOS蛋白的動(dòng)態(tài)變化與免疫組織化學(xué)顯示的陽性細(xì)胞數(shù)量變化一致。 結(jié)論 脾臟ICOS表達(dá)升高出現(xiàn)于EAU發(fā)生之前，隨炎癥的出現(xiàn)和加重而升高，在EAU消退期其表達(dá)有所降低，提示ICOS參與EAU的形成、發(fā)展和消退，在EAU發(fā)病中有重要意義。 (中華眼底病雜志,2005,21:114-117)
目的 觀察不同種系動(dòng)物眼內(nèi)腔針對可溶性抗原刺激是否具有支持誘導(dǎo)免疫偏離的能力及其維持時(shí)間。 方法 使用牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)作為可溶性抗原，將其分別接種于不同動(dòng)物(大鼠、兔和猴)的前房、玻璃體腔和視網(wǎng)膜下腔。皮下注射BSA和完全弗氏佐劑免疫動(dòng)物。皮內(nèi)注射抗原觀察眼內(nèi)腔接種BSA動(dòng)物的遲發(fā)型超敏反應(yīng)(delayed-type hypersensitivity,DTH)。定時(shí)評估免疫偏離的維持時(shí)間。 結(jié)果 所有眼內(nèi)腔接種抗原的動(dòng)物均顯示DTH陰性反應(yīng)。不同部位抗原接種后免疫偏離的平均維持時(shí)間分別為：前房組：大鼠70天，兔90天，猴320天；玻璃體腔組：大鼠100天，兔１50天，猴360天；視網(wǎng)膜下腔組：大鼠50天，兔70天，猴300天。 結(jié)論 不同種系動(dòng)物和不同眼內(nèi)腔免疫偏離的維持時(shí)間不同。生物進(jìn)化與免疫系統(tǒng)的進(jìn)化具有同步性。 (中華眼底病雜志, 1999, 15: 170-173)
目的 觀察1～16周糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(retinal vessel endothelial cells,RVECs)凋亡、增生特性的變化及p53和bcl-2的表達(dá)，探討糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)的發(fā)病機(jī)制。 方法 用四氧嘧啶造Wistar大鼠糖尿病模型。視網(wǎng)膜血管行碳素墨水灌注，作視網(wǎng)膜鋪片和切片、核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)dUTP缺口翻譯法(TdT mediated dUTP mick end labelling method，TUNEL法）和抗生物素蛋白-生物素-過氧化物酶復(fù)合物法(avidin biotin peraxidase complex, ABC)染色，光鏡觀察。 結(jié)果 1～16周糖尿病大鼠RVECs未見凋亡。與對照組大鼠視網(wǎng)膜相比，血管形態(tài)和結(jié)構(gòu)無明顯變化。第10～16周糖尿病大鼠RVECs呈增生細(xì)胞核抗原、5-溴-2-脫氧核苷尿嘧啶、p53和bcl-2免疫反應(yīng)陽性，但未見內(nèi)皮細(xì)胞堆積和新生血管形成征象。對照組大鼠RVECs為陰性反應(yīng)。 結(jié)論 1～16周糖尿病大鼠RVECs尚未發(fā)生凋亡和增生，但10周時(shí)已被激活進(jìn)入細(xì)胞周期。p53和bcl-2的表達(dá)可能對穩(wěn)定早期糖尿病RVECs正常起重要作用。 (中華眼底病雜志, 1999, 15: 157-159)