華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 關(guān)鍵詞 包含"D-半乳糖" 1條結(jié)果
  • 半乳糖對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞擬衰老作用的實(shí)驗(yàn)研究

    目的 探討D-半乳糖(D-galactose, D-gal) 誘導(dǎo)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)衰老后的形態(tài)學(xué)及生物學(xué)變化情況。方法 取3只2月齡SD大鼠MSCs分離培養(yǎng)至第3代,一部分置于含8 g/L D-gal的培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)至第6代作為誘導(dǎo)組;另一部分在原培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)至第6代作為對(duì)照組,并作表型鑒定。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)對(duì)照組加入8 g/L Dgal后4 d內(nèi)細(xì)胞周期的分布變化。兩組MSCs培養(yǎng)7 d并繪制生長(zhǎng)曲線,在光鏡和透射電鏡下觀察其形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化,β-半乳糖苷酶染色、單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)DNA損傷方法檢測(cè)其衰老后的生物學(xué)行為變化。結(jié)果 誘導(dǎo)組MSCs鏡下呈典型的衰老細(xì)胞形態(tài);對(duì)照組MSCs形態(tài)均勻,長(zhǎng)勢(shì)良好。流式細(xì)胞儀檢測(cè)表明加入D-gal誘導(dǎo)后90% MSCs停留在G 0/G 1期,而S期和G 2/M期MSCs趨于消失,并隨誘導(dǎo)時(shí)間延長(zhǎng)趨勢(shì)越明顯;對(duì)照組MSCs各期比例正常。MSCs生長(zhǎng)曲線示誘導(dǎo)組生長(zhǎng)速度較對(duì)照組明顯減慢。誘導(dǎo)組約85%呈β-半乳糖苷酶陽(yáng)性染色,對(duì)照組染色為陰性。單細(xì)胞凝膠電泳示誘導(dǎo)組MSCs DNA有拖尾現(xiàn)象,對(duì)照組MSCs無(wú)DNA損傷。結(jié)論 D-gal對(duì)SD大鼠MSCs的老化具有誘導(dǎo)作用,初步推斷8 g/L為最適濃度,為研究MSCs衰老提供了較好的模型。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:25 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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